بررسی تاثیر بیوتین و اسیدفولیک بر حرکت، حیات، شکل، تراکم کروماتین و تمامیت غشا اسپرم انجماد و ذوب شده در مردان نورموزواسپرمی

زمینه و هدف: انجماد یکی از تکنیکی رایج در باروری-ناباروری است، با تولید رادیکال‌های فعال اکسیژن موجب آسیب سلول اسپرم و عملکرد آن می‌شود. تشخیص سلامت و قدرت باروری اسپرم انجماد، ارزیابی مارکرهای مختلف در مردان ناباروری است. در این مطالعه، هدف ما بررسی تاثیر بیوتین و اسید فولیک بر حرکت، حیات، شکل، تراکم کروماتین و تمامیت غشا اسپرم انجماد و ذوب شده در مردان نورموزواسپرمی است.مواد و روش ها: در این مطالعه‌ی تجربی، 30 نمونه نورموزواسپرمی جمع‌آوری شد. هر نمونه، شامل گروه تازه قبل از انجماد، گروه‌های انجماد شده ی کنترل، بیوتین10 mm))، اسیدفولیک (50 nm) و ترکیب بیوتین (10 mm) و اسید فولیک (50 nm). اسپرم‌ها به مدت دو هفته با تکنیک رایج انجماد در دمای 196- درجه‌ی سانتی‌گراد انجام و سپس ذوب شدند. نمونه ها قبل و بعد از انجماد از لحاظ حرکت با نرم افزار آنالیز اسپرم computer-aided sperm analysis ارزیابی شد. حیات اسپرم با رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین، تراکم کروماتین با رنگ آمیزی تولوییدین بلو (toluidine blue) و تمامیت غشا با hypo osmotic swelling test بررسی شدند. یافته ها: قبل از انجماد حرکت، حیات، شکل ، تراکم کروماتین، تمامیت غشا اسپرم در همه گروه‌ها بیشتر و اسپرم‌های بی‌حرکت کمتر دیده شد (p <0.001). کیفیت کروماتین، در گروه‌های اسید فولیک، بیوتین+اسیدفولیک وبیوتین نسبت به کنترل بیشتر بود. میانگین حیات اسپرم در سه گروه بیشتر از کنترل بود. اسپرم با غشا سالم در گروه‌های اسیدفولیک، بیوتین و ترکیب هر دو بیشترازکنترل بود (p <0.001). پس از انجماد ارتباط مثبت بین کیفیت طبیعی کروماتین اسپرم و یکپارچگی غشا اسپرم دیده شد.نتیجه‌گیری: بیوتین و اسید فولیک اثر محافظتی روی کیفیت کروماتین، غشای سالم، حیات اسپرم و نقش مهمی در حفظ پارامترهای اسپرم بعد از انجماد داشت.

effects of biotin and folic acid on motility, viability, morphology, chromatin density and integrity of cryopreserved and thawed sperm in normozoospermic men

background and aim: cryopreservation is one of the common techniques in the management of infertility, which can damage the sperm cell and its function by producing reactive oxygen species. to determine health and fertility of cryopreserved sperm, we evaluated different markers in infertile men. the aim of this study was to investigate the effect of biotin and folic acid on motility, viablity, shape, chromatin density and membrane integrity of cryopreserved and thawed sperm in normozoospermic men.material and method: in this experimental study, 30 samples were collected from normozoospermic men. every sample included fresh pre-cryopreservation group, cryopreserved control groups, biotin (10 mm), folic acid (50 nm), and combination of biotin (10 mm) and folic acid (50 nm) groups. sperms were frozen for two weeks using the usual freezing technique at -196 ° c and then thawed. samples were evaluated for motility before and after freezing using computer-aided sperm analysis software. we assessed sperm viability by eosin-negrosin staining, chromatin density by toluidine blue staining and membrane integrity by hypo osmotic swelling test.results: before cryopreservation, motility, viability, chromatin density, sperm membrane integrity were higher and the number of immotile sperms were lower in all groups (p <0.001). quality of chromatin was higher in the groups of folic acid, biotin + folic acid and biotin than in the control group. mean sperm viability was higher in the three above mentioned groups than in the control group. we found higher sperm membrane integrity in the folic acid, biotin and combination groups than in control group (p <0.001). after cryopreservation, a positive correlation was found between sperm chromatin quality and membrane integrity.conclusion: biotin and folic acid showed a protective effects on chromatin quality, membrane integrity, viability of the sperms and played an important role in maintaining sperm parameters after cryopreservation.