اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک مهارکننده نوروکینین-1 رسپتور (Nk1r) بر سلول-های مالتیپل میلوما

زمینه و هدف: با وجود پیشرفت‌ های درمانی در دهه ‌های اخیر، مالتیپل میلوما (mm) همچنان یکی از دلایل مهم مرگ و میر در جهان است. بر اساس مطالعات قبلی که بیانگر نقش neurokinin1receptor (nk1r) در پاتوژنز سرطان ‌ها بوده است، تصمیم گرفتیم تا اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک aprepitant (آنتاگونیست nk1r) را در رده سلولی kmm1 (مشتق از mm) بررسی کنیم.مواد و روش‌ ها: در این مطالعه تجربی، برای بررسی اثرات سایتوتوکسیک aprepitant در مالتیپل میلوما، رده سلولی kmm1 (تهیه‌ شده از دانشگاه تربیت مدرس) با دوزهای مختلف مهار کننده (5، 15،30 و 45 میکرومولار) تیمار گشته و سپس درصد زنده‌ مانی، شمارش سلولی، فعالیت متابولیک و القاء آپوپتوز به ترتیب با استفاده از تریپان بلو، mtt و رنگ آمیزی annexin/pi بررسی گردید. علاوه بر این، آنالیز بیان ژن به کمک روش realtime pcr جهت تعیین مکانیسم مولکولی عملکرد aprepitant در سلول ‌های kmm1 انجام شد.یافته‌ ها: نتایج نشان داد که مهار nk1r با استفاده از aprepitant موجب مهار رشد سلول ‌های kmm1 می شود. همچنین دریافتیم که اثرات سایتوتوکسیک دارو ناشی از توقف سلول ‌ها در فاز g1 و القاء آپوپتوز است؛ چرا که درصد سلول ‌های رنگ گرفته با annexine/pi در سلول ‌های تیمار شده افزایش یافته بود (p<0.05). همچنین، نتایج realtime pcr نشان داد که apreptant نسبت بیان ژن ‌های پروآپوپوتیک به آنتی‌ آپوپتوتیک را از طریق تغییر بیان bax و bcl2 تغییر می ‌دهد.نتیجه ‌گیری: در این پژوهش، کارآمدی aprepitant در سلول ‌های kmm1 کاملاً مشخص شد؛ با این وجود، برای تضمین بی‌ خطر و موثر بودن این دارو در درمان بیماران mm نیاز به انجام مطالعات بیشتر در آینده است.

Cytotoxic and apoptotic effects of neurokinin-1 receptor (NK1R) antagonist on multiple myeloma cells

Background and Aim: Despite therapeutic improvements in recent decades, multiple myeloma (MM) still remains as one of the leading causes of death all over the world. Previous studies have indicated role of neurokinin1 receptor (NK1R) in the pathogenesis of cancer. Therefore, we decided to evaluate cytotoxic and apoptotic effects of aprepitant (NK1R antagonist) on MMderived KMM1 cell line.Material and Method: In this experimental study, for assessment of cytotoxic effect of aprepitant on MM cells, KMM1 (prepared in Tarbiat Modarres University) were exposed to different concentrations of the inhibitor (5,15, 30 and 45 micro;M) and subsequently viability, cell count, metabolic activity, and induction of apoptosis were investigated using trypan blue, MTT, and annexin/PI staining assays respectively. Moreover, in order to examine the molecular mechanism of action of aprepitant in KMM1 cells, gene expression analysis was performed by realtime PCR.Results: The results indicated that NK1R inhibition using aprepitant resulted in considerable growth suppression of KMM1 cells. Moreover, we found that the cytotoxic effects were likely due to cell arrest in G1 phase and induction of apoptosis, as revealed by the increased percentage of annexinV/PI double positive cells among the inhibitortreated cells (P<0.05). Also, RQPCR analysis revealed aprepitant changed the ratio of expression of pro apoptotic to anti apoptotic genes by way of alteration in the expression levels of Bax and Bcl2 (P<0.05).Conclusion: The present study highlighted the efficiency of aprepitant in suppression of the growth of KMM1 cells; however, further studies are needed to determine the safety and efficacy of this agent for the treatment of MM patients.