تاثیر ویتامین ث بر القاء کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند در محیط آزمایشگاه

زمینه و هدف: تکنولوژی استفاده از سلول های بنیادی به دلیل عدم وجود یک سیستم کشت ایده آل برای رشد و تکثیر این سلول ها محدود شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر غلظت های مختلف ویتامین ث بر القاء کلونی زایی این سلول ها در محیط کشت است.روش بررسی: سلول های اسپرماتوگونی بیضه بره نابالغ طی دو مرحله هضم آنزیمی جدا و به روش حذف تمایزی خالص سازی شدند. این سلول ها به مدت 10 روز به چهار روش تیمار شدند: گروه شاهد شامل کشت ساده سلول های اسپرماتوگونی در محیط dmem حاوی 1 درصد آنتی بیوتیک و 5 درصد fbs و تیمارهای 1، 2 و 3 شامل محیط بالا و به ترتیب 20، 40 و 60 میکروگرم بر میلی لیتر ویتامین ث بود. تعویض محیط کشت هر 3 روز انجام شد و تعداد و قطر کلونی های تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 پس از کشت به وسیله میکروسکوپ معکوس بررسی گردید. شناسایی سلول ها با رنگ آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه pgp9.5 انجام شد. یافته های حاصل از پنج بار تکرار با استفاده از نرم افزار r و آزمون آماری آنالیز واریانس مورد بررسی قرار گرفت و 0.05>p بعنوان سطح معنی داری تعیین گردید.یافته ها: مساحت کلونی های اسپرماتوگونی در روز 7 در تیمار 2 (0.41) اختلاف معنی داری با تیمار 3 (0.08) داشت (0.05>p). همچنین مساحت کلونی ها در روز 10 کشت در تیمار 2 با دیگر گروه ها اختلاف معنی دار داشت (0.05>p).نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان می دهد که ویتامین ث در دوز 40 میکروگرم بر میلی لیتر دارای تاثیر مثبت افزایشی بر مساحت کلونی های اسپرماتوگونی است ، اما روی تعداد سلول های اسپرماتوگونی بی تاثیر است.