بررسی پاتوژن‌های بی‌هوازی بیماران پریودنتیت و ارتباط آن با پلی مورفیسم ژنومی tgf-1β(فاکتور انتقال رشد) با روش tetra arms-pcr

زمینه و هدف: پریودنتیت یک بیماری عفونی شایع و التهابی است که باعث تخریب بافت‌های نگهدارنده دندان و متعاقب آن از دست رفتن دندان می‌شود. پریودنتال، بیماری‌ چند میکروبی و چند عاملی بوده و باکتری‌های مهم بی‌هوازی در عفونت پریودنتیت نقش دارند. tgf-1β یکی ازفاکتورهای رشد و سایتوکاین ضد التهابی است که در ترمیم ضایعات پریودنتال نقش تعیین کننده دارد. هدف از این مطالعه استفاده از روشtetra arms-pcr با حساسیت و ویژگی بالا برای بررسی پلی مورفیسم ژنومی در بین نمونه‌های دهانی و نشان دادن ارتباط بین tgf-1β و بیماری پریودنتال بود.روش بررسی: مطالعه حاضر به صورت موردی شاهدی در بخش پریودنتولوژی دانشکده دندانپزشکی کرمان انجام شد. از بین 100 نفر نمونه شامل 50 نفر سالم و50 نفر مبتلا به عفونت پریودنتال میکروبی نمونه‌ گیری صورت گرفت. ژنوتایپ با استفاده از dna استخراج شده از خون افراد بیمار باروش tetra arms-pcr بررسی شد تا ارتباط بین پلی مورفیسم ژنومیtgf-1β و بیماری پریودنتیت مشخص گردد. آنالیز آماری بانرم افزار spss19 و با روش anova یک طرفه (one way anova) انجام شد.یافته‌ها: تمامی نمونه‌ها کشت مثبت بوده و بیش از 65% از باکتری‌های جدا شده بی‌هوازی مطلق بود. باکتری‌های حاصله شامل: پورفیروموناس، فوزوباکتریوم، پپتواسترپتوکوک، پره ووتلا بی‌هوازی بود. نتایج حاصل از tetra arms-pcr پس از انجام سکانسینگ فراوانی ژنوتیپ (25%)cc ، (%20)ct ، (%5)tt بود. درصد گروه کنترل (20%)cc ، (%24) ct، (%6)tt و فراوانی آلل های c و t در گروه بیمار70% و 30% و در گروه کنترل63% و %37 بود که تفاوت معنی‌داری بین دو گروه نبود (p=83/0).نتیجه‌ گیری: با توجه به نتایج این مطالعه و بکارگیری شرایط بی‌هوازی، باکتری‌های بی‌هوازی اجباری را می‌توان از نمونه‌های بالینی عفونت‌های حفره دهان جدا کرد و با انجام tetra arms-pcr مشاهده گردید که ارتباط معنی‌‌داری بین پلی مورفیسم ژنومیtgf-1β و بیماری پریودنتیت وجود نداشت و تفاوت معنی‌داری نیز در فراوانی آلل‌ها و ژنوتیپ‌ها در بین دو گروه کنترل و بیمار مشاهده نشد.

Evaluation of anaerobic pathogens in periodontitis patients and its relationship with TGF-1β genomic polymorphism by Tetra Arms-PCR method

Background and Aims: Periodontitis is a common and inflammatory infectious disease that causes damage to the tissues supporting the tooth and consequent tooth loss. Periodontal disease is a multimicrobial and multifactorial disease and important anaerobic bacteria are involved in periodontal infection. TGF-1β is one of the growth factors and antiinflammatory cytokines that play a crucial role in the repair of periodontal lesions. The aim of this study was to evaluate Tetra Arms-PCR with high sensitivity and specificity, which can be used to evaluate the genomic polymorphism among oral samples and show the relationship between TGF-1β and periodontal disease.Materials and Methods: The present study was a casecontrol study in the periodontology department of Kerman Dental School. Sampling was done from 100 samples including 50 healthy individuals and 50 patients with microbial periodontal infection. Genotype was analyzed using DNA extracted from the blood of patients by PCR ARMsTetra to determine the relationship between TGF-1β genomic polymorphism and periodontitis. Statistical analysis was performed with SPSS19 software and oneway ANOVA.Results: The samples were culture positive, therefore, more than 65% of the isolated bacteria were anaerobic which included: Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Peptostreptococcus anaerobic. The results of Tetra PCR ARMs after sequence frequency were genotype CC allele (25%), CT allele (20%), TT allele (5%). Percentage of control group were CC allele (20%), CT allele (24%), and TT allele (6%). The frequency of C and T alleles in the patient group was 70% and 30%, and in the control group 63% and 37%, respectively with no significant difference between two groups (P=0.83).Conclusion: According to the results of this study and the application of anaerobic conditions, forced anaerobic bacteria can be isolated from clinical specimens of oral infections and by Tetra Arms-PCR no significant relationship between TGF-1β genomic polymorphism and periodontitis was observed. In addition, therer was no significant difference in the frequency of alleles and genotypes between the control and patient groups.