تاثیر dmso در القای تمایز کاردیومیوسیت ها از سلول های کارسینومای جنینیp19در شرایط آزمایشگاهی

مقدمه: در مطالعه حاضر توانایی تمایز سلول های کارسینومای جنینی p19در غلظت های مختلف dmso به کاردیومیوسیت ها مورد ارزیابی قرار گرفت.مواد و روش ها: جهت تمایز سلول های p19، اجسام شبه جنینی(embryoid bodies,ebs) به روش قطرات آویزان طی 2 روز تشکیل شدند. سپسebs به مدت 18 روز تحت القائات غلظت های مختلف dmso 1/0 درصد، 5/0 درصد، 1 درصد، 5/1 درصد، 2 درصد قرار گرفتند. طی تمایز تعداد ضربان در دقیقه هر سه روز یک بار در گروه های مختلف با میکروسکوپ معکوس شمارش شدند. جهت شناسایی بیان پروتئین factin از ایمونوسیتوشیمی استفاده شد.یافته های پژوهش: تغییرات مورفولوژیکی زیادی در کاردیومیوسیت های مشتق شده از p19 به ویژه در گروه dmso 5/0 درصد ایجاد شد به طوری که افزایش مشخصی در اندازه سیتوپلاسم و زواید سیتوپلاسمی آن ها دیده شد. نتایج شمارش روزانه نشان داد که حداکثر تعداد ضربان در دقیقه در غلظت 5/0 درصد و در روز 12+2 (2 روز برای تشکیل اجسام شبه جنینی به علاوه 12 روز پس از القای تمایز) مشاهده شد. علاوه بر این کاردیومیوسیت تمایز یافته پروتئین factin را تنها در حضور غلظت 5/0 درصد dmso بیان کردند در حالی که این پروتئین در سایر غلظت ها بیان نشد.بحث و نتیجه گیری: یافته های پژوهش حاضر پیشنهاد می نماید که اولاً موثرترین غلظت dmsoدر فرآیند القای کاردیوژنزیس غلظت5/0 درصد است. ثانیاً یکی از مطلوب ترین رده های سلولی جهت تمایز کاردیومیوسیت ها، سلول های کارسینومای p19 می باشد.

The Effect of DMSO in Induction of Differentiation of Cardiomyocytes from Embryonic Carcinoma Cells P19 in Invitro

Introduction: In the present study, the ability of P19 embryonic carcinoma cell differentiation to cardiomyocytes in different concentrations of DMSO was evaluated.Materials Methods: In order to providing differentiated P19 cells, embryoniclike objects (Embryoid Bodies, EBs) formed during 2 days through hanging drops method. Then EBs induced for 18 days under the different concentrations of DMSO (0.1%, 0.5%, 1%, 1.5% and 2%). The rate of cardiomyocytes beating was counted with three days interval in the various groups by inverse microscope. Immunocytochemistry was used to illustrate expression of Factin protein. Findings: Many morphological changes occurred in cardiomyocytes derived from P19 especially in DMSO 0.5% group, so a remarkable increase in the size of the cytoplasm and cytoplasmic processes was observed. The results revealed that the maximum beating frequency per minute was observed in DMSO 0.5% group concentration in 2+12 days (2 days for making emberyonic bodies, and 12 days after differentiation induction). In addition, only cardiomyocytes induced differentiation by DMSO 0.5% concentration expressed Factin which was not expressed in the other concentrations. Discussion Conclusion: The findings of this study suggest that, firstly, the most effective concentration in the process of cardiogenesis induction is 0.5%. Secondly, P19 carcinoma cells are desirable and susceptible to differentiate cardiomyocytes.