جدا سازی و استفاده از Dna آپتامرها در تشخیص و شناسایی مورفین

چکیده مقدمه: با توجـه به ویژگی های قطعات کوچک نوکلیوتید(الیگونوکلیوتیدهای تک زنجیره ای) از جمله تــوانایی آن ها در استفاده ابزاری برای تشخیص بعضی از مولکول های کلیدی تصمیم گرفته شد تا تجربیاتی در رابطه با به دست آوردن یک قطعه dna که تمایل زیادی در اتصال به مولکول مورفین دارد، حاصل گردد.مواد، روش ها و یافته های پژوهش: برای این منظور ابتدا یک کتابخانه الیگونوکلیوتیدی که شامل دو توالی مشخص 21 و 19 نوکلیوتیدی در دو سر '5 و '3 یک توالی40 نوکلیوتیدی در وسط که از نظر ترتیب اسیدنوکلییک تصادفی بوده تهیه گردید، با توجه به این که چهار نوع اسیدنوکلییک وجود دارد و توالی 40 اسید نوکلییک دارد حدود 1015 زنجیره dna حاصل گردید که استخر الیگونوکلیوتیدی نام برده شد. پس از تکثیر توسط pcr در معرض مولکول هدف که مورفین بود و به یک بستر ثابت شده بود قرار گرفت و پس از شستشو با یک بافر و خروج زنجیره هایی که به مولکول هدف متصل نشده بودند توسط یک بافر دیگر که توانایی جدا کردن زنجیره های dna را از مولکول هدف داشتند جدا گردید و این عمل تا 15 مرتبه تکرار گردید. سپس در بار آخر از پرایمر هایی استفاده گردید که در انتهای 5 آن یک مولکول فلورسین قرار گرفت و به وسیله تکنیک فلوسایتومتری کارایی زنجیره برای تشخیص مولکول هدف(مورفین) اثبات کنیم.بحث و نتیجه گیری: مولکول مورفین به واسطه اهمیت آن از نظر اجتماعی، اقتصادی برای دولتمندان کشور، هدفمند انتخاب گرید. در این راستا با استفاده از تجارب دیگر محققین سیستم جداسازی این قطعه نوکلیوتید(الیگونوکلیوتید) طراحی گردید و در نهایت به قطعاتی دست یافتیم که پس از تعیین توالی می توانیم به جای آنتی بادی های مونوکلونال که هم اکنون برای تشخیص مورفین در کیت های سریع به کار می روند استفاده گردد با این تجربه پا به عرصه علوم نانوبیوتکنولوژی می گذاریم که در امتداد آن به استفاده از الیگونوکلیوتیدها در درمان و هم چنین انتقال دارو به سلول های هدف و پیگیری تاثیر دارو بر سلول ها و در نهایت کمک به تصویر برداری خواهیم رسید.