بررسی اثر سیتوتوکسیک عصارۀ آبی گیاه اسپند بر ردۀ سلولی hct116 مقاوم به اگزالی‌پلاتین و ارزیابی بیان ژن‌ bax

مقدمه: سرطان کولورکتال یکی از شایع‌ترین تومورهای بدخیم دستگاه گوارش در جهان است. اگزالی‌پلاتین یک داروی شیمی‎درمانی موثر برای درمان سرطان کولورکتال است. بااین‌حال، استفاده طولانی‌مدت از این دارو اغلب به مقاومت دارویی منجر می‌شود. توسعۀ روش‌هایی برای کاهش مقاومت سلول‌های سرطان کولورکتال به اگزالی‌پلاتین بسیار مهم است. اسپند درمان ضدسرطان رایجی در طب سنتی است.مواد و روش ها: در این تحقیق از دوزهای مختلف عصارۀ آبی دانه‌های اسپند برای تیمار سلول‌های hct116 مقاوم به اگزالی‌پلاتین به مدت 24 و 48 ساعت استفاده شد. زنده‌ماندنی سلول‎ها با استفاده از روش متیل تیازول تترازولیوم تعیین گردید؛ سپس استخراج rna از سلول‌های تیمارشده (ic50) و سلول‌های کنترل انجام شد. برای اندازه‌گیری غلظت rnaهای استخراج‌شده از نانودراپ استفاده گردید؛ سپس از rna‎های استخراج‌شده cdna سنتز شد و میزان بیان ژن bax با استفاده از real time pcr بررسی گردید. در این مطالعه، میزان fold change با نرم‌افزار rest محاسبه شد؛ همچنین برای تجزیه‌وتحلیل آماری از نرم افزار graph pad prism 8 و آزمون t test میان نمونه‌های کنترل و تیمار استفاده گردید. p کمتر از 0.05 معنی دار در نظر گرفته شد.یافته های پژوهش: نتایج تجزیه‌وتحلیل نشان داد که میان افزایش غلظت عصاره و درصد سلول‌های مرده ارتباط معنی‌داری وجود دارد. میزان سمیت سلولی عصارۀ آبی دانه‌های اسپند از 24 ساعت به 48 ساعت، در ردۀ سلولی hct116 مقاوم به اگزالی‌پلاتین افزایش معنی داری داشت. علاوه بر این، افزایش قابل‌توجه و معنادار در سطح بیان نسبی ژن bax در مقایسه با گروه کنترل مشاهده شد (p<0.001).بحث و نتیجه‌گیری: در این مطالعه مشاهده گردید که اثر سایتوتوکسیک عصارۀ آبی اسپند وابسته به دوز و زمان بود. عصارۀ آبی اسپند این توانایی را دارد که با تنظیم ژن‌های آپوپتوز، ازجمله تقویت ژن‎های پروآپوپتوز مانند bax، باعث مرگ سلولی در سلول‎های سرطان کولورکتال شود. نتایج نشان می‌دهد که عصارۀ آبی اسپند می‎تواند به‌طور بالقوه در درمان سلول‎های سرطان کولورکتال مقاوم به دارو مفید باشد.

investigating the cytotoxic effect of aqueous extract of peganum harmala on oxaliplatin resistant hct116 cell line and evaluating bax gene expression

introduction:  colorectal cancer is a prevalent digestive tract malignancy, with oxaliplatin being an effective chemotherapeutic drug, but long term use can lead to drug resistance. it is crucial to develop methods to reduce crc cells’ oxaliplatin resistance. peganum harmala l. (p. harmala), is a common anticancer treatment in traditional medicine.materials & methods: the study used p. harmala seeds extract to treat oxaliplatin resistant hct116 cells for 24 and 48 hours. cell viability was determined using the mtt assay, and rna extraction was performed from the treated and control cells. cdna synthesis was performed using extracted rnas, and the expression level of the bax gene was analyzed using real time pcr. statistical analysis was conducted using graph pad prism 8 software and t test, with a significance level of p less than 0.05.results: findings indicated a significant correlation between the increase in the concentration of extract and the percentage of dead cells. the cytotoxicity of the aqueous extract of p. harmala seeds significantly increased from 24 to 48 hours in oxaliplatin resistant hct116 cells. furthermore, a significant and considerable upregulation in the relative expression of the bax gene was observed compared to the control group (p<0.001).conclusion: the cytotoxic effect of the aqueous extract of p. harmala is dose and time dependent. the extract has the potential to induce apoptosis in colorectal cancer cells by regulating apoptosis related genes, particularly by upregulating pro apoptotic genes such as bax.