تاثیر ویتامین c بر مقاومت دارویی 5-fu در سلول‌های سرطانی کولون ht29

مقدمه: امروزه، تحقیقات گسترده‌ای در استفاده از آنتی‌اکسیدانت‌ها در کاهش آثار جانبی شیمی داروها و شکستن مقاومت سرطان نسبت به شیمی ‌دارو در حال انجام است. هدف این مطالعه نیز، استفاده از ویتامین c به‌عنوان آنتی‌اکسیدانت و تعیین تاثیر آن در مقاومت دارویی سلول‌های ht29 است.مواد و روش‌ها: در طول این مطالعۀ مورد_شاهدی، ابتدا سلول‌های ht29 کشت داده شدند و با استفاده از روش mtt assay، تکثیر سلولی و یا مرگ سلول‌ها در تیمار با ویتامین c و داروی5fu بررسی گردید؛ همچنین آزمون dapi برای نشان دادن آپوپتوز سلولی صورت گرفت. پس از استخراج rna و تهیۀ cdna، برای تعیین سازوکار مولکولی آپوپتوز توسط دارو و اثر مهارکنندگی و یا تشدید ویتامین c بر سیگنالینگ سلولی آپوپتوز، بیان ژن‌های مرتبط با رشد و آپوپتوز مارکرهای casp3, bax به روش realtime pcr سنجیده شد. یافته‌های پژوهش: نتایج به‌دست‌آمده از آزمایش mtt نشان داد که ویتامین c هیچ تاثیر معنا‌داری (p<0.05) در کاهش اثر 5fu در آپوپتوز سلول‌ها ندارد. نتایج دپی و dna ladder assay به‌دست‌آمده از تیمار سلول‌های ht29 تغییرات کیفی آپوپتوز سلولی را نشان داد. علاوه بر این، نتایج realtime pcr نشان داد افزایش معنا‌داری در بیان ژن bax و casp3 بر سلول‌های سرطانی کولون ht29 در تیمار با شیمی‌ دارو وجود دارد.بحث و نتیجه‌گیری: یافته‌ها نشان داد ویتامین c مانع تاثیر شیمی ‌دارو نشد، اگرچه هیچ تاثیر مثبتی هم بر روی رشد سلول‌های سرطانی نداشت؛ بنابراین، مصرف ویتامین c از سوی بیمارانی که در حال شیمی‌درمانی هستند، هیچ ممانعتی بر تاثیر دارو نخواهد داشت و می‌تواند بیمار را از آثار جانبی دارو محافظت کند.

Investigation of the Effects of Vitamin C on Resistance to 5-FU in Colon Cancer Cells Line HT29

Introduction: There is growing evidence about the use of antioxidants to reduce the side effects of chemotherapy and cancer drug resistance. Therefore, this study aimed to use vitamin C as an antioxidant and determine its effect on drug resistance in HT29 cells. Materials Methods: During this casecontrol study, HT29 cells were first cultured and evaluated by MTT assay for cell death in the presence of vitamin C and 5FU. DAPI staining was also performed to visualize cell apoptosis. After RNA extraction and cDNA preparation, to determine the molecular mechanism of apoptosis by the drug and the inhibition effect or aggravation of vitamin C on cellular signaling of apoptosis, expression of growthrelated genes and apoptosis of Caspase3 and Bax were measured by realtime PCR. Findings: The results of the MTT test showed that vitamin C had no significant effect on cell apoptosis induced by 5FU. DAPI and DNA ladder assay results from HT29 cells showed qualitative changes in cell apoptosis. In addition, realtime PCR results revealed increased expression of Bax and Caspase3 in HT29 colon cancer cells treated with chemotherapy. Discussions Conclusions: Our findings showed that vitamin C did not prevent the effect of chemo drug although it had no positive effect on the growth of cancer cells. Therefore, vitamin C intake by patients undergoing chemotherapy will not affect the drug #39;s effect on the tumor and may protect the patient from side effects.