بررسی تاثیر کشت هم جوار باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز بر میزان بیان ژن های casp3و bax در سلول های سرطانی کولون ht29

مقدمه: سرطان کولون در کشورهای توسعه یافته شیوع یافته است. باکتری های پروبیوتیک، نقش مهمی در کاهش ابتلا به سرطان کولون و درمان سرطان کولون را می توانند ایفا کنند هدف از این مطالعه بررسی تاثیر کشت هم جوار باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز بر میزان بیان ژن های casp3 و bax در سلول های سرطانی است.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی پس از کشت باکتری ها، مایع رویی و عصاره باکتریایی تهیه شده و سلول ها توسط این مواد تیمار شدند. اثرات سمیت سلولی عصاره سلول باکتری روی رده سلولی ht29با استفاده از روشmtt بررسی شد. پس از استخراج rnaو تهیهcdna ، میزان بیان ژن های bax، casp3در رده سلولی ht29با استفاده از روش real time pcr مورد بررسی قرار گرفت.یافته های پژوهش: نتایج آزمایشmtt نشان داد که لاکتوباسیلوس رامنوز در غلظت 10 میکروگرم بر میلی لیتر باعث کاهش بقای سلول ht-29 به میزان 8.32 ±51.49 درصد شد و نتایج رنگ آمیزی دپی نشان داد تیمار سلول های ht29با باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز باعث تغییرات کیفی آپوپتوز سلولی می شود. نتایج real time pcr نشان داد که باکتری های لاکتوباسیلوس رامنوز سبب افزایش معنی دار بیان ژن های bax (0.22±4.2) و (casp3(0.12 ±6.88 در مقایسه با ژن کنترل در سلول های سرطانی کولون ht29 شد(p<0.05). بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که باکتری‌ های لاکتوباسیلوس رامنوز میزان بیان ژن ‌bax, cas3 را افزایش داده و سبب القای آپوپتوز در رده سلولی ht29می شود. بنا بر این با انجام مطالعه های بیشتر می توان از این باکتری به عنوان یک محصول پروبیوتیک ضد سرطان در درمان و پیشگیری از سرطان کولون استفاده نمود.

The Study of Expression of Casp3/Bax Genes in HT29 Colon Cancer Cell Line with Lactobacillus rhamnosus Co-Culturing

Introduction: Colon cancer has spread to developed countries. Probiotic bacteria can play an important role in reducing cancer and treating colon cancer. The aim of this study was to determine the effect of adjacent bovine Lactobacillus rhamnose culture on the expression of casp3 and bax genes in cancer cell. Materials Methods: In this experimental study after bacterial culture, supernatant and bacterial extract were prepared and the cells were treated with these materials. The effects of cell cytotoxicity of the cell line on the HT29 cell line were investigated using MTT method. After extraction of RNA and preparation of cDNA, the expression of bax, casp3 genes in the HT29 cell line was investigated using Real Time PCR. Findings: The results of MTT assay showed that Lactobacillus ramnose at a concentration of 10 mu;g/ml reduced the survival of HT29 cells by 51.49 ±8.32%, and the coloring results detection showed that treatment of HT29 cells with Lactobacillus rhamnosis caused qualitative changes in cell apoptosis. Realtime PCR results showed that lactobacillus rhamnose bacteria significantly increased the expression of bax genes (4.2 ±0.22) and casp3 (6.88 ±0.92) compared to control gene in cancer cells of the HT29 colon (P<0.05). Discussion Conclusions: The results of this study showed that lactobacillus ramose bacteria increase the expression of bax, cas3 gene and cause induction of apoptosis in HT29 cell line. Therefore, further studies can be used as an anticancer probiotic product in the treatment and prevention of colon cancer.