بررسی اثر اوژنول بر بیان ژن ‌های Casp8 و Casp9 در سلول ‌های رده سرطان کولون Ht-29

مقدمه: در سال های اخیر بسیاری از مطالعات علمی و پزشکی نشان می دهند که اوژنول با فعالیت ضد التهابی، آنتی اکسیدانی، تاثیرگذاری بر چرخه سلولی و القاء آپوپتوز می تواند در پیشگیری و کاهش سرعت پیشرفت سرطان مفید واقع شود. در همین راستا پژوهش حاضر نیز اثر اوژنول بر قابلیت زیست پذیری و میزان بیان ژن های casp8 و casp9 در سلول های رده سرطان کولون انسان(ht29) را مورد بررسی قرار داده است.مواد و روش ها: در پژوهش حاضر سلول های رده سرطان کولون انسان(ht29) در محیط کشت rpmi-1640 غنی شده با 10 درصد سرم جنین گاوی کشت داده شدند. با تیمار سلول ها در غلظت های 250، 500، 750، 900 و 1000 میکرومولار اوژنول و انکوبه شدن در زمان های 24، 48 و 72 ساعت، میزان قابلیت زیست پذیری سلول ها با استفاده از آزمون mtt بررسی شد. بیان ژن های casp8 و casp9 نیز به وسیله تجزیه و تحلیل real-time pcr در سلول های تیمار شده در غلظت 750 میکرومولار و در سه زمان مورد بررسی قرار گرفت.یافته های پژوهش: همگام با افزایش غلظت و مدت زمان تیمار، هر دو رده سلولی با کاهش درصد سلول های زنده مواجه شدند که البته این کاهش در سلول های سرطانی بسیار بیشتر از سلول های فیبروبلاستی مشاهده شد. هم چنین در رده تیمار شده با غلظت 750 میکرومولار، بیان ژن های casp8 و casp9 به صورت معنی داری نسبت به گروه های کنترل افزایش یافت.بحث و نتیجه گیری: اوژنول احتمالاً دارای اثر مهاری بر رشد، تکثیر و تهاجم سلول های رده سرطان کولون از طریق افزایش بیان ژن های casp8 و casp9 دارد و آپوپتوز را در سلول های دودمان سرطانی ht-29 القاء کرده و موجب کاهش خطر سرطانی شدن سلول های عادی شود.

Study the Effect of Eugenol on CASP8 and CASP9 Gene's Expression in Colon Cancer Cell Lines HT-29

Introduction: Many scientific and medical studies in the recent years have shown that Eugenol could be an effective reagent in preventing and reducing cancer progression by antioxidant and antiinflammatory activities and induction of apoptosis in cancer cells. In this regard the present study also examined the effect of Eugeonl on the viability and expression of CASP8 and CASP9 genes in human colorectal cancer cell line (HT29). Materials Methods: In the present study, human colorectal cancer cell line (HT29) was cultured in RPMI1640 medium enriched with 10% bovine serum. The cells were treated in different concentration (250, 500, 750, 900, 1000 mu;M) of Eugenol and incubated for 24, 48 and 72 hours. After that cell viability was analyzed by MTT assay. The expression of CASP8 and CASP9 genes was also evaluated by Realtime PCR analysis in treated cells at 750 mu;M concentration of Eugeonl and during 24, 48 and 72 hours, incubation. Findings: Along with increasing concentration and duration of Eugenol treatment, both cell lines encountered a decrease in the percentage of live cells. Although this reduction was found to be much higher in the cancer cells than in fibroblastic cells. Also, in the treated group with a concentration of 750 mu;m, expression of CASP8 and CASP9 genes significantly increased compared to control groups. Discussion Conclusions: Eugenol may have an inhibitory effect on the growth, proliferation and invasion of colon cancer cells by increasing the expression of CASP8 and CASP9 genes, and inducing apoptosis in HT29 cancer cells and reducing the risk of cancerous cell proliferation it turns out.