روش ساده و کم هزینه جهت جداسازی مونوسیت ها

زمینه و هدف: مونوسیت ها یکی از اجزای مهم سیستم ایمنی هستند که در پاسخ های التهابی و پاسخ های ایمنی ذاتی نقش مهمی ایفا می کنند؛ بنابراین جداسازی این سلول ها در تحقیقات ایمنی شناسی دارای اهمیت فراوان بوده و به همین دلیل روش های مختلفی برای جداسازی این سلول ها ابداع شده است. یکی از کم هزینه ترین و آسان ترین روش ها جداسازی با استفاده از خاصیت چسبندگی این سلول ها است که در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفته است.روش کار: در این روش بعد از جداسازی سلول های تک هسته ای خون محیطی، با استفاده از خاصیت چسبندگی مونوسیت ها به سطح پلاستیکی این سلول ها از سوسپانسیون سلولی جدا سازی شدند و سپس با استفاده از آنتی بادی های اختصاصی نشاندار با رنگ فلورسنت (pe، fitc) متصل شونده به مارکرهای اختصاصی cd11b و cd14 بر سطح مونوسیت ها رنگ آمیزی گردید و درصد خلوص سلول های جداسازی شده مشخص شد.یافته ها: پس از جدا سازی مونوسیت ها و بررسی آن ها با دستگاه فلوسایتومتری نتایج بیانگر این موضوع بود که 2/90 درصد از سلول های جداشده دو مارکر cd11b و cd14 را بیان می کردند.نتیجه گیری: گرچه روش های جداسازی مختلفی برای مونوسیت ها وجود دارد اما هرکدام دارای مزیت ها و معایبی هستند. یکی از آسان ترین و کم هزینه ترین این روش ها جداسازی براساس خاصیت چسبندگی این سلول ها است که امکان جداسازی این سلول ها با درصد خلوص بالا را فراهم می کند.

Simple and Least expensive method for monocyte isolation

Abstract Background: Monocytes are a key component of the immune system, which play an important role in inflammatory and innate immune responses. So the isolation of these cells is important in immunology researches and accordingly many methods have been developed for the monocyte isolation. One of the least expensive and simple separation methods is using the ability of these cells to adhere to solid surfaces that were examined in this study.Methods: In this way, after the isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), monocytes were isolated from cell suspension by using the adhesion ability of these cells to the plastic surface.Isolated monocytes were stained by using specific antibodies labeled with fluorescent dyes (PE, FITC) binding to specific markers on the surface of monocytes CD11b and CD14 and the purity of cells were characterized by flow cytometry.Results: Flow cytometry results after separation of monocytes shown that 90.2% of cells were expressed two markers CD11b and CD14.Conclusion: Although there are several monocyte isolation methods, each of them have advantages and disadvantages. One of the least expensive and Simple method of isolation is using adhesion ability of these cells that provides possibility of monocyte isolation with high purity.