تعیین جهش در اگزون 8 ژن P53 در بیماران مبتلا به تومور مغزی از نوع آستروسایتوما

زمینه و هدف: اکثر پژوهش ها نشان داده اند که بین ایجاد تومور های مغزی و میزان بدخیمی تو مورها و ژن های سرکوب گر تومور و انکون ها ارتباط وجود دارد. هدف از انجام این پروژه بررسی جهش های اگزون 8 ژن p53 در بیماران مبتلا به تومور مغزی از نوع آستروسیتوما می باشد.روش کار: این تحقیق از نوع تجربی آزمایشگاهی بوده و طی آن ابتدا استخراج dna از 30 نمونه بافت تازه مغز به روش فنول کلروفورم انجام شد و بعد از انجام pcr اگزون 8 ژن p53 غربالگری اولیه از طریق sscp (single strand conformation polymorphism) برای تشخیص شیفت در نمونه ها انجام شد. سپس مواردی که دارای شیفت بودند تعیین توالی شدند.یافته ها: در این تحقیق یک جهش بدمعنی (missense) g.13851a>g (تبدیل اسید آمینه ای k291e) در بیمار مبتلا به آستروسایتوما درجه چهار شناسایی شد.نتیجه گیری: بر اساس یافته های این مطالعه میتوان تغییر بد معنی فوق که در ناحیه متصل شونده به dna فاکتور رونویسی p53 رخ داده را تحت عنوان یک جهش پاتوژن در نظر گرفت. احتمالا این جهش از عملکرد سرکوب گر توموری این فاکتور جلوگیری میکند و منجر به سرطان میشود. این مسئله در ژن درمانی و تشخیص زود هنگام تومورهای مغزی میتواند حائز اهمیت باشد.

Evaluation of exon 8 p53 gene mutation in patient affected by astrocytoma brain tumor

Background: Most studies have shown that there are association between the development and malignancy of brain tumors and tumor suppressor genes and oncogenes. The aim of this project was to investigate the P53 gene mutations in exon 8 in patients with astrocytoma type rsquo;s brain tumor.Methods: In this present survey, The DNA isolation from 30 samples of brain tissue was done by phenolchloroform protocols. After PCR amplification for p53 at exon 8, screening by SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism) was performed to determine the mobility shifts. Samples that have shift were sequenced.Results: A malignant missense nucleotide changes (g.13851A>G) was found at exon 8 in a sample with grade 4 of astrocytoma. The sequence changes at protein level of this mutations is K291E.Conclusion: Based of the study finding, the above nucleotide change which was found within the protein's DNA binding domain could be a pathogenic mutation. This mutation can prevent tumor suppressing function of p53 and possibly causes cancer. This may be important in early diagnosis and gene therapy of brain tumors.