شناسایی ویروس‌های آنفلوانزای A/H3n2 مقاوم به اسلتامیویر با تست Real-Time Rt- Pcr

زمینه و هدف:در سال‌های اخیر با افزایش اپیدمی‌های ویروس‌های آنفلوانزایaتحقیقات زیادی در مورد پیشگیری و درمان این ویروس‌ها انجام شده است. دارویاسلتامیویر یا تامی فلو (مهارکننده نورامینیداز (na) ویروس) به عنوان یکی از داروهای موثر درپیشگیری و درمان این ویروس‌ها می‌باشد. جهش در چند سایت مختلف ژن na باعث ایجاد مقاومت دارویی می‌گردد. جهش h274y از مهم‌ترین تغییرات ایجادکننده مقاومتدارویی در ویروس‌های آنفلوانزای a می‌باشد. هدف این مطالعه شناسایی ویروس‌های آنفلوانزایa/h3n2 مقاوم به اسلتامیویر با بررسی جایگاه 274 با تست realtime rtpcr می‌باشد.روشکار: در ابتدا پرایمر و پروب‌هایاختصاصی جهت شناسایی ویروس‌های a/h3n2حساس و مقاوم طراحی شد، سپس تستrealtime rtpcr جهت شناسایی جهش در جایگاه 274 از ژن na انجام گرفت.  یافته‌ها: از 50 نمونه مورد آزمایش تمامی آن‌ها فاقدجهش h274y بوده و لذا هیچ ویروس مقاومی در این نمونه‌ها یافتنشد.نتیجه‌گیری: شناسایی سریع و دقیق موتانت‌های مقاوم بهدارو برای راهکارهای درمانی موثر امری ضروری بشمار می‌رود. تست ealtime rtpcr بهعنوان تستی سریع و با توان بالای عملیاتی می‌تواند در آزمایشگاه‌های تشخیص طبی به عنوانتست روتین برای شناسایی مقاومت ویروس‌های آنفلوانزا به داروهای مهارکنندهنورامینیداز بکار رود.

Detection of Oseltamivir Resistant Influenza A/H3N2 viruses by Real-time RT-PCR

Background: Currently, with increasing risk of influenza A virusepidemics, a lot of studies have been performed. Oseltamivir or Tamiflu (theneuraminidase (NA) inhibitor) is one of the effective drugs for preventing andtreatment of these viruses. The H274Y mutation is from the most important drugresistant factors in influenza A viruses. The aim of this study was detectionof Oseltamivir resistant influenza A/H3N2 viruses by 274 position inspectionusing Realtime RTPCR.Methods: Initially, specific primers and probs for detection ofsensitive and resistant A/H3N2 viruses were designed. The Realtime RTPCRassay was performed to detect mutation in 274 position of NA gene.Results: Of 50 A/H3N2 specimens, all were negative for H274Ymutation and no resistant viruses were selected.Conclusion: Quick and accurate recognition of drug resistant mutantsis necessary for effective treatment strategies. Realtime RTPCR assay is arapid operational test which could be performed in the laboratories fordetection of influenza viruses resistant to NA inhibitor.