بررسی مولکولی جهش های غیر حذفی ژن های آلفاگلوبین بیماران آلفا تالاسمی دراستان کرمانشاه

زمینه و هدف : آلفاتالاسمی یک بیماری تک ژنی با توارث اتوزومی مغلوب بوده و در جمعیت هایی با منشاء مدیترانه ای و آسیای جنوب شرقی شایع می باشد. بررسی شیوع جهش های غیر حذفی این بیماری می تواند راهنمای مفید و سریعی جهت پیش گیری، کنترل و تشخیص قبل از تولد این بیماری باشد. روش کار : دراین مطالعه توصیفی ndash; تحلیلی از 40 فرد ارجاعی به آزمایشگاه ژنتیک پزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه با اصلیت کرمانشاهی، با (fl 80>) mcv و (27>) mch پایین تر از حد طبیعی و سطوح hb f و hb a2 طبیعی یا کاهش یافته، نمونه گیری به عمل آمد. این افراد فاقد حذف های شایع ژن آلفا گلوبین بوده اند. dna ژنومی این افراد به روش salting out تخلیص و با تکنیک arms pcr جهش های نقطه ای شایع آلفاتالاسمی بررسی شد. نمونه هایی که فاقد جهش های حذفی و جهش های نقطه ای مورد بررسی بودند ژن های α1 و α2 آن ها تعیین توالی شدند. یافته ها : در 39 مورد از 40 فرد مورد بررسی، 6 نوع جهش مشخص گشت. شایع ترین جهش در بین نمونه مورد مطالعه جهش αpolya4 با فراوانی 37/5٪، پس از آن جهش α-5nt با فراوانی 35٪ وجهش αpolya6 با فراوانی 17/5٪ می باشد. جهش های hb adana ، α1+1mrna و α2+832 g>a از طریق تعیین توالی شناسایی گردیدند. نتیجه گیری: این مطالعه، جامع ترین مطالعه انجام شده در منطقه بوده و از نتایج این بررسی می توان جهت مشاوره ژنتیک، غربال گری جمعیتی و تشخیص قبل از تولد استفاده نمود.

Molecular analysis of alpha globin genes non deletional mutations in alpha thalassemia patients in Kermanshah province

Background: Alpha thalassemia is a single gene disorder, inherited in an autosomal recessive manner. The thalassemia occurs mostly in peoples from the Mediterranean to Southeast Asia. The present study was aimed to identify the prevalence of nondeletional Alpha thalassemia mutations in our samples in the Kermanshah province. Methods : This study included Alpha thalassemia individuals who had referred to Medical Genetics Laboratory, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran, between March 2009 and February 2011. Subjects were from different geographic areas of Kermanshah province in the west of Iran. Forty patients were selected upon having red cell indices suggestive of non deletional alpha thalassemia carrier status (MCV<80 fl and MCH<27pg, normal or slightly reduced HbA2 and HbF) after szlig; thalassemia, iron deficiency and deletional Alpha thalassemia were excluded. Blood samples were collected, and genomic DNA was extracted from peripheral blood leucocytes by salting out procedure. DNA analyses were performed using Amplification Refractory Mutation System (ARMS). Sequence analysis was applied for DNA samples when no mutation was detected with ARMS. Results: Six different types of mutations were determined in 39 subjects of 40 individuals. The most common Alphathalassemia mutation is alpha;polyA4 which comprises 37.5% of the total mutations, followed by alpha;5nt (35%) and alpha;polyA6 (17.5%). DNA sequencing of the amplified aglobin genes revealed Hb Adana, Alpha1+1mRNA and alpha2+ 8 32 (G>A) point mutations. Conclusions: This is the first comprehensive study in this region. The results of the study can be also applied for the genetic counseling, population screening and prenatal diagnosis.