تاثیر لیپوپلی‌ساکارید و پلی‌ریبوسیتدیلیک‌اسیدبه‌عنوان (آگونیست‌هایtlr)، بر میزان تولید نیتریک‌اکسایدو القاء آپوپتوزیس در سلول‌هایtفعال‌شده توسط سلول‌های بنیادی مزانشیمال موش

پیش زمینه و هدف:سلول های بنیادی مزانشیمال، سلول های بالغ پیش ساز غیر خون ساز و چندتوان معرفی می گردند. سیمای پیش التهابی یا ضدالتهابی این سلول ها در پاسخ های ایمنی با فعال شدن گیرنده های شبه تول خاص ظاهر می گردد. هدف پژوهش حاضر بررسی تاثیر لیپوپلی ساکارید و پلی ریبوسیتیدیلیک اسید در غلظت های مختلف و زمان های مختلف انکوباسیون بر میزان تولید نیتریک اکساید و القاء آپوپتوزیس در سلول هایtفعال شده و ارتباط این دو است.مواد و روش کار: از استخوان های ران و درشت نی به روش فلاشینگ، سوسپانسیون سلولی تهیه و سلول های مزانشیمال به روش چسبندگی پلاستیک جداسازی شدند. پس از بارآمدگی 70 درصدسلول ها، سلول ها با آگونیست های (tlr، poly: ic (یک و پنج میکروگرم بر میلی لیتر)، و lps 10و 20 نانوگرم بر میلی لیتر) و غلظت ترکیبی کمینه (poly: icیک میکروگرم بر میلی لیتر و lps 10 نانوگرم بر میلی لیتر) (lp) در دو زمان مجزای یک و 12 ساعت تیمار شدند. نیتریک اکساید مایع روئیسلول ها، با روش گریس سنجیده شد. درصد آپوپتوزیس سلول هایt ، با روش فلوسایتومتری رنگ آمیزی اکریدین-اورنج/پروپیدیوم - آیداید اندازه گیری گردید.یافته ها: یافته ها نشان داد که poly: ic بیشترین میزان آپوپتوزیس را در غلظت پایین (یک میکروگرم بر میلی لیتر و پس از گذشت 12 ساعت) اعمال می نماید. درحالی که بیشترین میزان آپوپتوزیس سلول هایt در تیمار با lps در غلظت بالا (20 نانوگرم بر میلی لیتر و یک ساعت) انکوباسیون به دست آمد (p<0.05). همچنین افزایش میزان آپوپتوزیس سلول هایt در ارتباط با تولید نیتریک اکسایدمی باشد.بحث و نتیجه گیری: بر اساس نتایج به دست آمده می توان نتیجه گرفت که غلظت آگونیست و زمان تیمار سلول های بنیادی با آن می تواند اثرات مختلفی در تولید نیتریک اکساید و فعالیت آپوپتوزیmscها داشته باشد.

EFFECT OF LPS AND POLY: IC (TLR AGONISTS) ON NITRIC OXIDE PRODUCTION AND APOPTOSIS INCUBATION IN ACTIVATED T CELLS BY MOUSE MESENCHYMAL STEM CELLS (MSCS)

AbstractBackground Aims: Mesenchymal stem cells (MSCs) were introduced as multipotent nonhematopoietic precursor adult cells. Pre or antiinflammatory features of these cells appear on immune responses by activating specific tool like receptors (TLRs). The aim of this study was to evaluate the effect of Lipopolysaccharide and Polyribocytidylic Acid on different concentration and times of incubation on nitric oxide production and apoptosis induction in activated Tcells.Materials Methods: Suspension cells were prepared through the femural and tibial bones by flushing method and Mesenchymal cells were isolated by plastic adhesion technique. When the cultures reached % 70 confluence, cells treated with TLR agonists, Poly: IC (1 and 5 micro g/ml), LPS (10 and 20 ng/ml) and the lowest combination concentrations (Poly: IC 1micro g/ml and LPS 10ng/ml) (LP) at two different times, 1 and 12hr. Nitric oxide of cell surface liquid were measured by Griess (year) method. Apoptosis percentage in T cells was assayed by flowcytometry in the presence of Achridin orangeropidium iodide (AO/PI).Results: The results showed that Poly: IC could induce the highest T cells apoptosis at low concentration (1 micro g/ml) after 12hr incubation. But, LPS could cause T cells apoptosis at high concentration (20 ng/ml) after 1hr incubation (P<0.05). Also, an increase in T cells apoptosis could be related to nitric oxide production.Conclusion: These findings suggest that the concentration of agonist and treatment period of the stem cells could affect nitric oxide production and apoptotic activity in MSCs.SOURCE: URMIA MED J 2016: 26(10): 864 ISSN: 10273727