بررسی میزان آلودگی به اشریشیاکلی o157:h7 در همبرگرهای عرضه شده در شهرستان ارومیه به روش کشت میکروبی و multiplex pcr و ارزیابی الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی جدایه ها

مقدمه: همبرگر از فرآورده های گوشتی پر‌مصرف در سطح جهان می‌باشد. اشریشیاکلی o157:h7 از سروتیپ های اشریشیاکلی خونریزی دهنده روده ای (ehec) می‌باشد که بیماری های مهم و خطرناکی را در انسان ایجاد می‌کند. مدفوع گاو، مخزن این باکتری بوده و گوشت گاو به‌دلیل عدم رعایت موازین بهداشتی در مراحل کشتار به این باکتری آلوده می‌گردد. هدف از بررسی حاضر، تعیین میزان آلودگی همبرگرهای عرضه شده در شهرستان ارومیه به اشریشیاکلی o157:h7 و تعیین الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی جدایه می‌باشد.مواد و روش کار: ابتدا با بررسی میدانی، کارخانه های عرضه‌کننده همبرگر در فروشگاه های عرضه مواد پروتئینی شهر ارومیه شناسایی شدند و تعداد 50 نمونه به‌صورت سهمیه ای و در فواصل زمانی مختلف و با رعایت شرایط سترون اخذ شدند. در آزمایشگاه کنترل کیفی مواد غذایی، ابتدا با استفاده از روش‌های استاندارد میکروب‌شناسی اشریشیاکلی از نمونه‌ها جداسازی شد. جهت جداسازی سروتیپ o157 اشریشیاکلی، جدایه ها در آگار سوربیتول مک‌کانکی (smac) کشت داده شدند و پس از مشاهده پرگنه های بی رنگ و با استفاده از آنتی سرم اختصاصی، سروتیپ o157 شناسایی شدند. تایید نهایی جدایه‌های اشریشیاکلی o157:h7 با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و حضور ژن های rfbo157 و flich7 صورت پذیرفت. آنتی‌بیوگرام جدایه ها به‌روش انتشار دیسک با استفاده از آنتی‌بیوتیک‌های آمپی‌سیلین، آموکسی‌سیلین-کلاوولانیک اسید، آزیترومایسین، تری‌متوپریم سولفامتوکسازول، جنتامایسین، سفیکسیم، سفتریاکسون، سیپروفلوکساسین، نیتروفورانتوئین و تتراسایکلین انجام شد. نتایج: از مجموع 50 نمونه همبرگر مورد آزمایش، همه نمونه ها (100 درصد) آلوده به اشریشیاکلی بودند. 21 جدایه براساس داده های میکروب شناسی و سرم شناسایی سروتیپo157 تشخیص داده شدند. نتایج pcr نشان داد که 18 جدایه (36 درصد) دارای ژن rfbo157 به اندازه 259 bp و ژن flich7 به اندازه 625 bp بوده و به‌عنوان سروتیپ o157:h7 شناسایی شدند. هم‌چنین درصد مقاومت آنتی‌بیوتیکی جدایه ها عبارت‌ بودند از: آمپی‌سیلین، 72 درصد، تری‌متوپریم سولفامتوکسازول، 56 درصد، سفتریاکسون، 50 درصد، تتراسایکلین، 50 درصد، نیتروفورانتوئین، 28 درصد، آموکسی‌سیلین-کلاوولانیک اسید، 28 درصد، سفیکسیم، 17 درصد، سیپروفلوکساسین، 17 درصد و جنتامایسین، صفر درصد. نتیجه گیری: آلودگی همبرگرهای عرضه شده در شهرستان ارومیه به اشریشیاکلی o157:h7 بالا می‌باشد و نظر به اینکه این سروتیپ باعث بیماری های خطرناکی در انسان می‌گردد؛ لزوم نظارت بر رعایت موازین بهداشتی در کشتارگاه ها و کارخانه های فرآورده های گوشتی به‌صورت جدی وجود دارد. با توجه به حساسیت 100 درصدی جدایه ها نسبت به جنتامایسین پیشنهاد می‌گردد از این آنتی بیوتیک برای درمان بیماری های کولیت خونریزی دهنده و سندرم اورمیک همولیتیک (hus) ناشی از اشریشیاکلی o157:h7 استفاده گردد.