بررسی اثرات سمیت سلولی پُست بیوتیک های تهیه شده از لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس la-5 بر سلول های سرطانی اپی تلیال روده (hct-116)

مقدمه و هدف: هدف از این مطالعه، تهیه دو نوع پست بیوتیک لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس la-5 در محیط کشت کلاسیک (mrs; de man,rogosa and sharpe agar) و مایع آب پنیر و مقایسه اثرات سایتوتوکسیک آن ها بر سلول های hct-116 به-عنوان مدلی از سلول های اپی تلیال روده بود.روش کار: ابتدا به منظور تهیه پست بیوتیک، پودر لیوفیلیزه لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس به محیط کشتmrs broth و سوسپانسیون آن به آب پنیر فراپالایش تلقیح گردید و در دمای 1±37 به مدت 24 ساعت در انکوباتور co2دار، گذاشته شد. بعد از گذراندن مدت زمان انکوباسیون و مشاهده رشد، از سانتریفیوژ با دور 4000 دور در دقیقه، به مدت پنج دقیقه برای جداسازی باکتری و مایع رویی استفاده شد. در نهایت مایع به دستگاه خشک کن انجمادی تحت خلاء (به مدت 48 ساعت تحت دمای 2 2- درجه سانتی گراد و فشارmtorr 100) منتقل و خشک گردید و پست بیوتیک تهیه شده مورد استفاده قرارگرفت.برای ارزیابی اثرات سمیت سلولی پست بیوتیک ها در غلظت های 625/0، 25/1، 5/2، 5، 10، 20 و 40 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر از تست mtt (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2h-tetrazolium bromide) و برای شمارش سلول های زنده از تست تریپان بلو استفاده شد.یافته ها: نتایج حاصل از تست mttحاکی از کاهش معنی‌دار زنده‌مانی سلول‌های hct-116 تحت تیمار با پست بیوتیک ها به-صورت وابسته به غلظت بود، به طوری که در غلظت بالا (10، 20 و 40 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر برای mrs و مایع آب پنیر) از دیدگاه آماری باعث کاهش معنی‌داری در میزان زنده‌مانی سلول‌های hct-116 از طریق کاهش فعالیت میتوکندریایی یا ظرفیت احیائی میتوکندری در آن‌ها گردید. نتیجه گیری: شدت تغییرات و سمیت سلولی در پست‌بیوتیک حاصل از کشت باکتری درmrs براث شدیدتر از پست‌بیوتیک حاصل از کشت باکتری در آب پنیر بود