انتقال ژن epsps تغییریافته باکتریایی به گیاه چغندرقند و غربال گیاهچه های تراریخت در محیط کشت و گلخانه برای تحمل به علف کش گلایفوسیت

تحمل به علف کش یکی از اولین صفاتی است که بوسیله مهندسی ژنتیک در چندین گونه زراعی معرفی شده است. در این پژوهش ژن epsps باکتریایی با دو جهش ( epsps-2mut ) برای ایجاد گیاه چغندرقند متحمل به علف کش گلایفوسیت منتقل گردید. در آزمایش های تراریختی از ژنهای nptii و epsps-2mut به عنوان ژنهای گزینشگر استفاده گردید. با استفاده از آنتی بیوتیک کانامایسین به عنوان عامل گزینشگر، % 6/ 36 نوساقه های باززایی شده مقاوم به کانامایسین بودند. کارایی انتخاب با کانامایسین % 3/ 19 تعیین گردید. امکان استفاده از ژن epsps-2mut به عنوان ژن گزینشگر نیز بررسی گردید. مناسب ترین روش گزینش با علف کش گلایفوسیت در آزمایش های تراریختی، انتقال ریزنمونه های برگی 25 - 15 روز پس از تلقیح با آگروباکتریوم به محیط کشت حاوی 0/ mm 1 گلایفوسیت به مدت 28 روز بود. با این روش 13 % نوساقه ها مقاوم به گلایفوسیت بودند و کارایی انتخاب به میزان 32 % تعیین گردید. در شرایط درون شیشه ای و گلخانه ای نشان داده شد که ژن epsps-2mut ، باعث ایجاد تحمل به علف کش گلایفوسیت در چغندرقند می گردد.

transfer of the modified bacterial epsps gene into sugar beet and screening of the transgenic plantlets in tissue culture medium and greenhouse for glyphosate tolerance

one of the first traits introduced by genetic engineering in several crop species is herbicide tolerance. in this study, the bacterial epsps gene with two mutations (epsps-2mut) was transferred to sugar beet to create a glyphosate-tolerant plant. the nptii and epsps-2mut genes were used as selectable markers in the transgenic experiments. using kanamycin as the selection agent, 36.6% of the regenerated plantlets were found to be resistant to kanamycin. the selection efficiency with kanamycin was determined to be 19.3%. the possibility of using epsps-2mut gene as a selectable marker was also investigated. the most suitable method for selection with glyphosate in the transgenic experiments was the transfer of leaf explants 15-25 days after inoculation with agrobacterium to a culture medium containing 1.0 mm glyphosate for 28 days. using this method, 13% of the plantlets were found to be tolerance to glyphosate, and the selection efficiency was determined to be 32%. under in vitro and greenhouse conditions, it was demonstrated that the epsps-2mut gene confers glyphosate tolerance in sugar beet.