تاثیر عصاره متانولی گیاه خرفه (l.oleracea portulaca ) بر تکثیر و تمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی انسانی به سلولهای استخوانی

هدف از این پژوهش بررسی اثر عصاره گیاه خرفه بر تمایز استخوانی سلولهای بنیادی مزانشیمی است. نمونه خون مغز استخوان با رضایت افراد گرفته شد و پس از انتقال به آزمایشگاه سلولهای آن استخراج و کشت داده شدند. سپس طی دوره کشت به منظور تایید هویت سلولهای بنیادی مارکرهای سطحی با روش فلوسایتومتری بررسی شدند. بعد از ان زنده مانی سلولی پس از تیمار با عصاره گیاه خرفه با assay mtt در دو بازه زمانی 24 و 48 ساعت سنجش شد. پس از سه هفته کشت تمایزی سلول ها در کنار مقدار موثر عصاره تمایز سلولها با رنگ آمیزی آلیزارین رد برای تایید تمایز استخوانی سلولهای بنیادی مزانشیمی بررسی شد.در نهایت بیان ژنهای تیمار شده ی ocn و 1col تحت عصاره با -real pcr time بررسی شد و نتایج مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج فلوسایتومتری نشان داد که سلولهای مورد بررسی دارای نشانگرهای سطحی29cd ، 105cdو 90cd بوده و نشانگر سطحی45cd, 34cd,را نداشتند که طبق پرتکل تاییدی بر مزانشیمال بودن سلولهاست. نتایج آزمون mtt نشان داد که تا غلظت 300 میکروگرم در میلیلیتر، عصاره گیاه خرفه به طور قابل توجهی زندهمانی سلولی را کاهش نمیدهد و نتایج رنگآمیزی پس از کشت تمایزی نشان داد که تشکیل کلسیم قابل مالحظهای صورت گرفته است که نشان دهنده تمایز موفقیتآمیز به سمت سلولهای استخوانی است.. نتایج pcr-time real ثابت کرد تیمار با عصاره گیاه خرفه منجر به افزایش قابل توجهی در بیان ژن 1col به میزان حدود 2.58 برابر و بیان ژن ocn به میزان حدود 2.37 برابر میشود.به طور خالصه، تیمار سلولهای بنیادی مزانشیمی با عصاره گیاه خرفه تمایز سلولی را به سمت خطوط سلولی استخوانی تشویق میکند

the effect of methanolic extract of artemisia plant on the proliferation and differentiation of human mesenchymal stem cells into bone cells

the aim of this research was to investigate the effect of portulaca oleracea osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells. firstly, the extract of portulaca oleracea was obtained, and then mesenchymal stem cells were extracted and cultured from bone marrow. flow cytometry was performed to confirm the identity of these cells and examine the surface markers ,cd 90,cd29, cd105, cd90, cd34 and cd45. alizarin red staining was also performed to confirm the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells. subsequently, cell viability after treatment with portulaca oleracea extract was measured using the mtt assay at two time points: 24 and 72 hours. finally, the expression of treated ocn and col1 genes was examined using real-time pcr, and the results were evaluated using the mann-whitney test. flow cytometry results showed that the examined cells expressed surface markers cd29, cd105, and cd90, while they did not express the cd45 and cd34 surface marker, indicating their mesenchymal stem cell nature. alizarin red staining results demonstrated significant calcium deposition, indicating successful differentiation toward osteoblasts. the cell viability assay showed that portulaca oleracea extract significantly reduced cell viability only up to a concentration of 300 micrograms per milliliter, indicating its biocompatibility. the gene expression analysis revealed a significant increase in col1 gene expression by approximately 2.58-fold and ocn gene expression by approximately 2.37-fold after treatment with portulaca oleracea extract. statistical analyses indicated that the p-values for both col1 and ocn genes were greater than 0.05, indicating no significant difference in gene expression between the control and portulaca oleracea -treated groups.in summary, treatment of mesenchymal stem cells with portulaca oleracea extract promotes cellular differentiation toward osteoblastic lineages, indicating a positive effect of this extract on the process of cellular differentiation