کاربرد روش mtt و محیط کشت dmem و fbs در مقایسه اثر عصاره گرده زنبورعسل بر سلول های سرطان پروستات و سلول های نرمال شبه فیبروبالستی

سرطان پروستات از شایع ترین سرطان هاست و مقابله با آن به روش پرتودرمانی، اغلب سلول های سالم را متاثر کرده و خطر ابتال به سرطان های ثانویه مانند سرطان مثانه را افزایش می دهد ولی مواد فیتوشیمیایی چنین نیستند. به این منظور از گرده هایی که توسط زنبور های عسل منطقه زاگرس جمع آوری شده استفاده شد. گرده ها به کمک تله گرده گیر که بر کندوها نصب شدند به دست آمدند. عصاره متانلی از گرده ها تهیه شد. سلول های سرطان پروستات رده -3pc و همچنین سلولهای نرمال شبه فیبروبالستی رده hff از بانک سلولی ایران خریداری شدند. کشت در محیط آنتی بیوتیک دار dmem و fbs انجام شد و پاساژ سلولی بعد از تراکم %90 سلول های محتوی فالسک صورت گرفت. غلظت های مختلف عصاره ،10 ،5 ،0/5 0/1 میلی گرم بر میلی لیتر تهیه شد. تست mtt در پلیت 96 خانهای استریل انجام شد. شدت رنگ تولید شده معرف تعداد سلول های زنده بود. محتوای هر چاهک در طول موج nm 570 در مقایسه با طول موج nm 630 با استفاده از دستگاه الیزا ریدر قرائت و درصد حیات سلول ها در مورد هر غلظت برای دو رده سلولی محاسبه شد. مقایسه اثر زمان تیمار ردههای سلولی با عصاره گرده نشان داد مقدار 50ic( غلظتی که در آن تنها %50 سلولها زنده می مانند( در سلولهای hff در زمانهای 48 و 72 ساعت تفاوت معناداری نداشت در حالی که در سلولهای -3pc این تفاوت معنادار بود و با گذشت زمان، 50ic به شدت کاهش پیدا می کرد (0.05>p(. به عبارتی اثر سیتوتوکسیک عصاره هم وابسته به دوز عصاره و هم وابسته به زمان بود. به این ترتیب با به کارگیری عصاره گرده زنبورعسل می توان ضمن حفظ سالمت بیشتر سلول های نرمال، به نابودی سلول های سرطانی پروستات امیدوار بود.

application of mtt assay and media consisting of dmem and fbs in comparing the effect of bee pollen extract on prostate cancer cells and normal fibroblastic cells

prostate cancer is one of the most common cancers and dealing with it by radiation therapy often affects healthy cells and increases the risk of secondary cancers such as bladder cancer, but phytochemicals do not have such side effects. bee pollen collected by honey bees in zagros region was used for this purpose. bee pollen was obtained with the help of pollination traps that were installed on the hives. methanolic extract was prepared from pollens. prostate cancer cells (pc-3( and normal fibroblastic cells (hff) were purchased from iran cell bank. cultivation was done in dmem and fbs medium with antibiotics, and cell passage was done after 90% concentration of the cells in the flask. different concentrations of extract were prepared as 10, 5, 0.5, 0.1 mg/ml. the mtt test was performed in a sterile 96-well plate. the intensity of the color produced was indicative of the number of viable cells. the content of each well was read at a wavelength of 570 nm compared to a wavelength of 630 nm using an elisa reader, and the percentage of cell viability was calculated for each concentration for two cell lines. comparison of the effect of treatment time of cell lines with pollen extract showed that the value of ic50 (concentration at which only 50% of cells survive) in hff cells at 48 and 72 hours was not significantly different, while in pc-3 cells, this difference was significant ic50 decreased strongly through time (p