فناوری کشت و ارزیابی میکروبیولوژی coli.e و استرپتوکوک – انتروکوک روده ای به عنوان میکروارگانیسم های موجود در آب و فاضالب به روش کشت سطحی

یکی از شاخصهای اصلی برای پایش آب و پساب خانگی، صنعتی و یا دیگر مصارف، تعداد کلیفرم به خصوص باکتری اشریشیاکلی یا کلیفرمهای گرم مثبت می باشد که به عنوان یک معیار و شاخص برای بررسی کیفیت آب و پساب خروجی شناخته میشوند و واکنشهای این گروه با محیط های کشت متفاوت مورد مطالعه قرار میگیرد. با توجه به اینکه زیستگاه اشرشیا کلی روده انسان و حیوانات خون گرم میباشد تفسیر آزمون آن دشوار است زیرا برخی از باکتْریهای کلیفرم در خاک و آبهای سطحی وجود دارند و الزاماً در روده نمیباشند بنابراین وجود باکتریهای کلیفرم، گرچه اثبات کننده آلودگی مدفوعی نیست اما، میتواند نشانه نقص در تصفیه انبارش و یا توزیع آب باشد. آزمونهایی که برای شناسایی و شمارش ارگانیزمهای شاخص و پاتوژنها وجود دارند؛ شامل دو روش برای کلی فرمها می باشد: روش پلیت گذاری (cfu (و روش تخمیر چند لوله ای (mpn (. در روش تخمیر چند لوله ای گزارش نتایج را معموالً به صورت mpn اعالم میکنند؛ این در حالی است که این تعداد شمارش، تعداد واقعی نمیباشد و تقریباً شاخص محتمل ترین تعداد باکتری های کلی فرمی)mpn )است که از نتایج بدست آمده از آزمون حاصل گردیده است. در مقایسه، روش پلیت گذاری مستقیم شمارش در 100 میلی لیتر نمونه در روش (unit forming colony(cfu ؛ کارشناس قادر به شمارش واقعی کلنی های کلیفرمی میباشد. آلودگی پاتوژنی آب توسط استرپتوکوک- انتروکوک مدفوعی مشخص میگردد. انتظار می رود کلیفرم های غیرگرما پای نسبت به کلی فرمهای گرماپای در شرایط نامساعد محیطی آب مقاوم تر بوده به مدت طوالنی تری زنده بمانند . شمارش باکتریهای هتروتروف با روشهای پورپلیت، گسترده یا کشت سطحی، صافی غشایی و یا روشهای سوبسترای آنزیمی چند محفظه ای انجام میگردد. این روشها تعداد باکتری های زنده را تخمین میزند که در نتیجه، اطالعات مفیدی درباره کیفیت آب و اهمیت نتایج آزمونهای کلیفرم ارائه می دهند. استانداردهای کیفی آب، coli.e و استرپتوکوک- آنتروکوک روده ای را به عنوان شاخصهای آلودگی فکال در نظر گرفته است. برای تخلیه این آبها میبایست حدود مجاز تعریف شده توسط سیستم ملی تخلیه آلودگی را رعایت نمود. با توجه به این که برای تخلیه پساب به آبهای ساحلی، تفریحی و دریاهای ایران )خلیج فارس، دریای عمان، دریای خزر( استاندارد خروجی به دریا توسط سازمان حفاظت محیط زیست معاونت محیط زیست دریایی و تاالب ها در سال 1399 تهیه شده است پایش باکتریهای انتروکوکسی و coli .e الزامی خواهد بود. در این مقاله به روش اندازه گیری coli.e و فکال کلیفرم و استرپتوکوک- آنتروکوک روده ای به روش cfu کشت سطحی که شاخص میکروبی پساب خروجی به دریا است می پردازیم.

microbiological assessment of water and wastewater quality using the spread plate technique, focus on e. coli and streptococcus-enterococcus faecalis

monitoring the quality of water and wastewater is crucial for various applications, including domestic, industrial, and recreational purposes. key indicators for this assessment include coliform bacteria, particularly escherichia coli, and gram-positive coliforms. distinguishing between these groups is essential as some coliform bacteria may naturally occur in soil and surface water, not necessarily originating from the intestinal tract. while the presence of coliform bacteria doesn t definitively indicate fecal contamination, it may signal issues in storage or water distribution. two primary methods for assessing coliforms are the plating method measured in colony forming units (cfu) and the multi-tube fermentation method (most probable number, mpn). two primary methods are employed for general coliform assessment: the plating method (measured in colony forming units, cfu) and the multi-tube fermentation method (most probable number, mpn). in the mpn method, the results are typically expressed as an estimate rather than an exact count, representing the most probable number of coliform bacteria obtained from the test results. in contrast, the cfu method involves direct plating and counting the actual coliform colonies per 100 ml of sample. counting of heterotrophic bacteria is done by pour plate methods, spread plate technology, membrane filtration (mf), or multi-compartment enzyme substrate methods. these methods assess the quantity of viable bacteria, yielding valuable insights into water quality and the interpretation of coliform test outcomes. water quality standards designate e. coli and intestinal streptococcus - enterococcus faecalis as indicators of fecal contamination. adherence to permissible limits, as outlined by the national pollution discharge system, is imperative for water discharge into coastal and marine environments. given the standards set forth by the environmental protection organization for the discharge of effluents into iran s coastal waters, close monitoring of enterococci and e. coli levels becomes essential. this article outlines the utilization of the spread plate technique (cfu) method for quantifying e. coli and fecal coliforms, as well as intestinal streptococci-enterococci, providing a valuable microbial index for effluents destined for marine discharge.