جداسازی سویه‌های متانوتروفی با استفاده از محیط‌های کشت مختلف

متان، یکی از گازهای گلخانه‌ای اتمسفری است که نقش بسزایی در گرمایش جهانی و تغییرات آب و هوایی دارد. تخمین زده می‌شود که این گاز، نسبت به دی‌اکسید­کربن‌ تاثیر چهار برابری اثر گلخانه‌ای دارد. متانوتروف‌ها دسته‌ای از باکتری‌ها هستند که می‌توانند بصورت هوازی یا بی‌هوازی روی منابع حاوی متان رشد کرده و طی فرآیند اکسیداسیون، این گاز را به دی‌اکسید کربن‌ تبدیل کنند و به این طریق نقش مهمی در کاهش غلظت گاز گلخانه‌ای متان دارند. هدف از این مطالعه، مقایسه دو محیط کشت معدنی مختلف برای کشت و جداسازی متانوتروف‌های بومی ایران بود. در این مطالعه، از خاک پالایشگاه نفت بندرعباس برای جداسازی متانوتروف‌ها استفاده‌ شد. دو محیط‌های پایه انتخاب شده بترتیب حاوی نمک نیترات پتاسیم و نمک کلرید آمونیوم به عنوان تنها منبع نیتروژن بود. لازم به ذکر است محیط مورد اشاره حاوی 5/1% نمک کلرید سدیم بود که با گاز متان بعنوان تنها منبع کربن غنی شده‌بود. نمونه خاک باروش رقیق سازی در محیط نمکی کشت داده‌شد. سپس از سوسپانسیون باکتریایی فوق، به محیط جامد انتقال داده‌شد تا کلنی­های تک به­دست آید. پس از واکشت‌های متعدد، هتروتروف‌های اقماری (satellite heterotrophs) حذف شد. با توجه به تعداد کلنی‌های رشد یافته، محیط کشت پایه نمکی حاوی نمک کلرید آمونیوم همراه با کلرید سدیم 5/1% برای جداسازی پیشنهاد می‌گردد.

isolation of methanotrophic strains using different culture media

methane is one of the atmospheric greenhouse gases that plays a significant role in global warming and climate change. it is estimated that this gas has a greenhouse effect four times greater than that of carbon dioxide. methanotrophs are a group of bacteria that can grow aerobically or anaerobically on methane-containing sources and convert this gas to carbon dioxide through oxidation processes, thereby playing an important role in reducing the atmospheric concentration of the greenhouse gas methane. the aim of this study was to compare the culture media in order to culture and isolate methanotrophic bacteria. in this study, soil from the bandar abbas oil refinery were used for the isolation of methanotrophs. the selected media contained potassium nitrate and ammonium chloride salts as nitrogen sources, respectively. it should be noted that 1.5% sodium chloride was added to the basal media. afterwards, all types of media were enriched with methane as the only carbon source. the soil sample were cultured in the mentioned media using the dilution method. subsequently, the resulting bacterial suspension was transferred to solid medium in order to achieve pure cultures for each. after multiple subcultures, satellite heterotrophs were eliminated. based on the number of grown colonies, a saline basal medium containing ammonium chloride along with 1.5% sodium chloride is recommended for isolation