تعیین برخی خواص بیوشیمیایی یک کراتیناز قلیایی بدست آمده از یک باکتری بومی جدا شده از خاک زباله طیور

کراتینازها کلاس ویژه ای از آنزیم ها هستند که توانایی تجزیه پروتئین های غنی از پیوند دی سولفیدی و بسیار آبگریز را دارند و به این خاطر تقاضای تجاری این آنزیم ها برای کاربردهای صنعتی مختلف افزایش یافته است. تولید کراتیناز توسط گونه‌های باکتریایی و خصوصیات این آنزیم‌ها، به طور گسترده گزارش شده است. در این مطالعه از خاک آلوده به ضایعات پر نواحی اطراف شهرستان گنبد کاووس سه جدایه باکتریایی با توانایی رشد بر روی محیط حداقل حاوی پر جداسازی شدند. با محاسبه نسبت قطر هاله به قطر کلونی در محیط اسکیم میلک آگار و درصد تجزیه پر، غربالگری صورت گرفت و باکتری با بالاترین درصد تجزیه پر انتخاب شد. سپس از طریق تعیین توالی ژن 16s rrna باکتری مورد نظر شناسایی گردید و در بانک ژنی ثبت شد. برای سنجش فعالیت آنزیمی از کازئین به عنوان سوبسترا استفاده شد و واحد فعالیت به صورت مقدار آنزیم مورد نیاز برای افزایش 0.1 واحد جذب در طول موج 280 نانومتر در مدت زمان یک دقیقه تعریف شد. برخی خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم از قبیل فعالیت در مقابل دما و ph تعیین شد. با توجه به تشابه 99.65 درصدی توالی نوکلئوتیدی، باکتری مورد نظر متعلق به جنس stenotrophomonas است و با شماره دسترسی pp411011 در genbank ثبت شد. با بررسی فعالیت آنزیمی در دماها و phهای مختلف مشخص شد که حداکثر فعالیت آنزیمی در دمای 50 درجه سانتی گراد و 10 ph بدست می آید. در مجموع نتایج نشان می دهد که کراتیناز استخراج شده می برای استفاده در صنعت شوینده و بازیافت پر می تواند مورد توجه قرار گرید.

determination of some biochemical properties of an alkaline keratinase from a native bacterium isolated from poultry waste soil

keratinases are specialized enzymes capable of breaking down disulfide-rich and hydrophobic proteins, leading to an increased commercial demand for their use in various industrial applications. bacterial species have been extensively studied for keratinase production and the characteristics of these enzymes. this study isolated three bacterial strains capable of growing on a minimal medium with feathers from soil contaminated by feather waste near gonbad kavus city. halo diameter to colony diameter ratios were calculated in skim milk agar, along with feather decomposition percentages, to screen and select the bacteria with the highest feather decomposition rates. the desired bacteria were identified and recorded in the gene bank by sequencing the 16s rrna gene. enzyme activity was measured using casein as a substrate, with one unit defined as the enzyme amount required to raise absorbance by 0.1 at 280 nm in one minute. the enzyme s biochemical characteristics, including its activity at various temperatures and ph levels, were assessed. the bacterium with a 99.65% nucleotide sequence similarity is classified in the genus stenotrophomonas and is deposited in genbank under accession number pp411011. the enzyme activity was maximized at a temperature of 50°c and a ph of 10. the results indicate that the extracted keratinase is a viable option for the detergent industry and feather recycling.