اثرات ضد باکتریایی ترکیب دارویی وانکومایسین/تری متوپریم بر بیان ژن blactx-m33 در اشریشیا کلی تولید‌کننده بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت ادراری

استفاده از ترکیب دارویی یکی از راهکارهای طلایی جهت درمان عفونت های ناشی از باکتری های تولید کننده بتا لاکتامازهای وسیع الطیف (esbls) از قبیل اشریشیا کلی تولید کننده esbl می باشد. هدف اصلی از پژوهش حاضر ارزیابی اثرات ضد باکتریایی ترکیب دارویی ونکومایسین/تری متوپریم بر میزان بیان ژن های مقاومت بتالاکتاماز blactx-m33 در اشریشیا کلی مقاوم جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت ادراری مراجعه کننده به بیمارستان شهید رجایی گچساران بوده است. در ابتدا 90 جدایه اشریشیا کلی از بیماران مبتلا به عفونت ادراری جدا و شناسایی گردید و متعاقبا، با استفاده از روش تاییدی دیسک ترکیبی جدایه های مولد esbls بر اساس پروتوکل استاندارد m100-s23 clsi مورد شناسایی قرار گرفت. در خصوص داروی ترکیبی ذکر شده ابتدا حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد (mic) دارو بصورت انفرادی و در حالت ترکیب با استفاده از روش میکرودایلوشن براث و تحت پروتوکل استاندارد m07‑a10 clsi انجام و بدنبال آن شاخص غلظت مهاری کسری (fic) تعیین شد. در نهایت میزان نسبی بیان ژن blactx-m33 با استفاده از تکنیک qpcr مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها حاکی از شناسایی 15 جدایه (24 %) به عنوان esbls بود. همچنین اثرات هم افزایی مناسبی ازترکیب تری متوپریم/ونکومایسن در جدایه های مولد esbls با fic بمیزان 5/1-281/0 شناسایی شد. در نهایت، ترکیب دو دارو بیانگر کاهش معنا دار بیان نسبی ژن blactx-m33 در تمام غلظت های آزمایش شده بمیزان 85/1 تا 16/2 واحد بود. در واقع، در غلظت های مورد آزمایش این کاهش معادل 5953 و 8477 برابربوده که باعث سرکوب شدن بیان ژن و متعاقبا متوقف شدن مقاومت دارویی شده است. نتایج حاصل از آزمایش نشان داد که ترکیب ونکومایسین/ تری متوپریم می تواند برای درمان عفونت های ادراری بسیار کارآمدتر باشد و مقاومت دارویی بالای جدایه های تولید کننده بتالاکتاماز در عفونتهای ادراری را بشدت کاهش دهد.

antibacterial therapy of vancomycin/trimethoprim on expression level of blactx-m33 gene of esbl-producing escherichia coli isolated from patients with urinary tract infection

combination therapy could be one of the gold strategies for the treatment of extended‑spectrum β‑lactamases )esbls(-producing bacteria such as esbl-escherichia coli. we aimed to evaluate the antibacterial effects of vancomycin/trimethoprim combination on β-lactamase resistant gene of e. coli isolated from patients with urinary tract infection referring to the shahid rajaii hospital of gachsaran. firstly, 90 isolates of e. coli were identified from patients with utis and subsequently, esbls isolates were identified using the confirmatory combined disc method based on clsi guidelines (m100-s23). the combination index assay was performed via microdilution broth test (m07‑a10) and interpreted with the fractional inhibitory concentration (fic) for vancomycin alone and in combination with trimethoprim. eventually, the relative expression level of blactx-m33 3 gene was determined using qpcr. findings showed that 15 isolates (24%) were identified as the esbls. data indicated that combination of vancomycin/trimethoprim with exerted synergistic effects in esbls isolates with fic index ranged from 0.281 to 1.5. on the other hand, combination of vancomycin /trimethoprim could reduce significantly the expression level of blactx-m33 gene in different concentrations tested ranging from 1.85 to 2.16 fold based on mics. indeed, the expression level of blactx-m33 was down-regulated 5953 and 8477 fold, respectively, causing knockdown of gene expression. these results suggest the possibility of vancomycin/trimethoprim to treat utis with a higher efficiency. it is concluded that vancomycin/trimethoprim combination may diminish resistance in the e. coli‑producing esbl isolated from uti patients.