تولید میکروکپسول ها ی پروبیوتیکی باسیلوس مجاونسیس

پروبیوتیک‌ها میکروب‌های زنده‌ای هستند که حضورشان در مواد غذایی، با بهبود فلورهای میکروبی دستگاه گوارشی اثارمفیدی برای میزبان خود دارد. تحقیقات نشان داده که باکتری‌های تولید کننده‌ی لاکتیک اسید، به خصوص باسیلوس ها به دلیل داشتن اندوسپور در دماهای بالا پایدار باقیمانده و خواص پروبیوتیکی خود را در دماهای بالا حفظ میکنند. هدف این پژوهش جداسازی باسیلوس مقاوم به عنوان پروبیوتیک از خاک و تولید میکروکپسول از گونه‌ی برتر می باشد. در این پژهش ابتدا 5 نمونه‌ی از خاک پارک جمشیدیه به صورت تصادفی برداشته شد. نمونه خاک طی روش تهیه رقت سریالی و تیمار حرارتی جهت جداسازی انحصاری جنس باسیلوس مورد آزمایش قرار گرفت. در ادامه خالص‌سازی کلنی‌های رشد یافته و رنگ‌آمیزی اسپور، آزمون کاتالاز، اکسیداز به منظور تایید اولیه جنس باسیلوس انجام شد و سپس آزمایش‌هایی همچون مقاومت اسید، نمک، تست نمک صفرا و مقاومت آنتی‌بیوتیکی به جهت تایید پروبیوتیک بود باسیلوس‌های خالص شده انجام گرفت. به منظور مشخص شدن دقیق تر جنس و گونه‌ی برتر با ویژگی پروبیوتیکی شناسایی مولکولی (سکانسینگ 16srrna) انجام گرفت. در مرحله بعد تولید میکروکپسول سویه باسیلوس با ویژگی های پروبیوتیکی با استفاده از آلژینات‌سدیم انجام گردید. آنالیزهای تاییدی تشکیل میکروکپسول جهت بررسی تایید تشکیل میکروکپسول و اندازه ذرات و شمارش میکروکپسول‌ها و پایداری آن‌ها انجام گردید. در این پژوهش 32 سویه باسیلوس جداسازی شدند که از این 32 سویه 7 سویه ویژگی پروبیوتیکی از خود نشان داده و در نهایت سویه تحت عنوان zk1 به عنوان سویه شاخص با نشان تمام ویژگی‌های پروبیوتیکی انتخاب گردید. پس از سکانسینگ 16srrna سویه مورد نظر با جنس و گونه‌ی باسیلوس موجاونسیس (bacillus mojavensis) mk764986 با درصد تشابه 8/99 درصد تایید هویت گردید. نتایج میکروکپسولاسیون با آلژینات‌سدیم طی آنالیزهای ذکر شده با اندازه‌ی گویچه‌ها معادل12-5 میکرومتر و پراکندگی یکنواخت را تایید نمود. از دست آوردهای این مطالعه میتوان اشاره نمود که اکوسیستم خاک بومی کشور و سویه‌های باسیلوس جدا شده از آن، منبع مناسبی جهت تولید و معرفی باکتری بومی ارزشمند و غیر بیماریزا به عنوان منبع جدید از باکتری‌های پروبیوتیکی میتوان معرفی شوند. در این پژوهش دریافتیم باسیلوس‌ها با دارا بودن اسپور پس از اثبات ویژگی‌های پروبیوتیکی‌شان به دلیل مزایایی مانند ماندگاری بالا جهت بقا در فرآورده‌های غذایی و دارویی و ... میتوانند مورد استفاده قرار گیرند.

production of bacillus mojavensis probiotic microcapsules

probiotics are alive microbes that when added to food, improves the florid microbes in digestion system and it has positive effect for the host body. study shows that the bacteria producing lactic acid specially bacillus in high temperature remain stable because of having endospore, and keep the probiotic features at cooking temperatures. the goal of this study is the separate resistant bacillus from the soil and to produce microcapsules of a strong species. in this research first, we took five sample from jamshidieh park randomly, then by serial dilution and thermal agitation to separate exclusively bacillus in this research. next purification of grown colonies and coloring the spore’s catalase test, oxidase test verifies the first material of bacillus was conducted. next, some test such as acid resistance, salt test, bile salt test, and antibiotics resistance test were done to check the probiotics being of the bacillus which were purified, in order to clearly specify the material and species of the stronger one’s probiotic molecular sequencing (16srrna) were conducted. next stage, the production of microcapsules, the bacillus probiotic using sodium alginate were done. the analyses to verify production of microcapsules were done. in this study 32 strain of bacillus were separated in which 7 strain has probiotic features and finally (zk1) was the specific strain with all the feature of probiotics was selected. after sequencing (16srrna) the special strain had similar characteristic of bacillus mojavensis up to 99.8% percent was identified. microcapsuling result with sodium alginate in the mentioned process microcapsules with the size of 12-5 micrometer with uniform dispersion were verified. by the result of this study, we can say that the local soil in this country and the sample bacillus separated from it, is a good source to produce and identification of local valuable bacteria and non-pathogenic as new source of probiotic bacteria. in this study we found that bacillus whit spores which have probiotic feature for great maintenance can be use in food and pharmaceutical industries.