تشکیل بیوفیلم و چسبندگی سلولی acinetobacter baumannii atcc 19606 و یک جدایه بالینی آن بر رده سلولی hela در حضور و غیاب آنتی بادی ضد oma87 و سیتوتوکسیته ی حاد آنتی ژن

Acinetobacter baumannii که در چند دهه ی اخیر به عنوان یک پاتوژن بیمارستانی فرصت طلب شناخته شده است ، مهم ترین تهدید کننده ی سلامت بیماران بستری در بیمارستان ها به شمار می رود. وجود عوامل مختلف و چند جانبه که در بیماری زایی a. baumannii شرکت می کند باعث شده تا درمان و مقابله با آن با مشکل مواجه شود. به طوری که سازمان بهداشت جهانی a. baumannii را در ردیف خطرناک ترینپاتوژن ها معرفی کرده است. از جمله مهم ترین عوامل حدت در a. baumannii می توان به پورین های موجود در غشای خارجی آن اشاره کرد. oma87 یا bama یکی از مهم ترین اجزای کمپلکس bam می باشد که وجود این کمپلکس برای وارد کردن پروتئین های مختلف به غشای a. baumannii ضروری می باشد و در واقع یک عامل کلیدی برای حیات باکتری های گرم منفی برشمرده می شود .همین امر باعث شده تا oma87 یک گزینه ی موفق برای مقابله با a. baumannii معرفی شود. پروتئین oma87 با استفاده از وکتور بیانی و باکتری e. coli به عنوان میزبان، بیان شد و پس از تخلیص به موش های balb/c در سه نوبت تزریق شد و هربار پس از تزریق خونگیری انجام شد و تیتر آنتی بادی مورد ارزیابی قرار گرفت. با تزریق پروتئین به موش ها سمیت حاد پروتئین نیز بررسی شد .هم چنین تست بیوفیلم در حضور و غیاب آنتی بادی ضد oma87 انجام گرفت . سلول های hela الوده شده با دو سویه ی استاندارد و بالینی a. baumannii تحت تیمار با سرم ضد oma87 قرار گرفتند و تست های سمیت سلولی، چسبندگی و اینترنالیزیشن انجام شد. هم چنین نقش میکروفلامنت های اکتینی سلول hela در میزان ورود a. baumannii به سلول نیز از طریق اخلال در روند سنتز اسکلت سلولی با استفاده از سیتوکالازین مورد ارزیابی قرار گرفت. آنتی بادی ضد oma87 قادر است تولید بیوفیلم توسط دو سویه استاندارد و بالینی را تا حد قابل قبولی کاهش دهد . هم چنین نتایج حاصل از تست های سلولی بر این امر دلالت داشت که oma87 از طریق تحریک اتوفاژی می تواند باعث اپوپتوز ناقص شود که همین امر باعث می شود به صورت بالقوه تکثیر باکتری درون سلول میزبان افزایش یابد. یافته های این پژوهش نشان می دهد که پروتئین oma87 می تواند به عنوان یک گزینه درمانی جدید مورد ارزیابی قرار گیرد . موارد بررسی شده در این پژوهش و تجزیه و تحلیل نتایج حاصل از ان ، کمک ارزشمندی به منظور درک بهتر نحوه بیماری زایی a. baumannii و حدت باکتری می باشد و راه را برای استراتژی های درمانی برای مقابله با a. baumannii هموار تر خواهد کرد.

formation of biofilm and cellular adhesion of acinetobacter baumannii atcc 19606 and a clinical isolate on hela cell line in the presence and absence of anti-oma87 antibody and acute cytotoxicity of the antigen

acinetobacter baumannii, recognized in recent decades as an opportunistic nosocomial pathogen, poses a significant threat to the health of hospitalized patients. the presence of various multifaceted factors involved in the pathogenicity of a. baumannii has made its treatment and control challenging. the world health organization has classified a. baumannii among the most dangerous pathogens. one of the most critical virulence factors in a. baumannii is the porins present in its outer membrane. oma87, or bama, is one of the key components of the bam complex, which is essential for incorporating various proteins into the membrane of a. baumannii. this complex is crucial for the survival of gram-negative bacteria, making oma87 a promising candidate for combating a. baumannii. in three doses, the oma87 protein was expressed using an expression vector, and e. coli as a host was purified and injected into balb/c mice. blood samples were collected after each injection, and the antibody titer was evaluated. the acute toxicity of the protein was also assessed following its injection into the mice. biofilm formation tests were conducted in the presence and absence of the anti-oma87 antibody. hela cells infected with both standard and clinical strains of a. baumannii were treated with anti-oma87 serum, and cellular toxicity, adhesion, and internalization tests were performed. the role of actin microfilaments in hela cells in the entry of a. baumannii was also evaluated by disrupting the cytoskeletal synthesis using cytochalasin. the anti-oma87 antibody was found to significantly reduce biofilm production by both the standard and clinical strains. furthermore, the results of the cellular tests indicated that oma87 could induce incomplete apoptosis through autophagy stimulation, potentially increasing bacterial proliferation within the host cell. the findings of this research suggest that the oma87 protein could be evaluated as a new therapeutic option. the aspects investigated in this study and the analysis of the results provide valuable insights into the pathogenicity of a. baumannii and its virulence, paving the way for more effective therapeutic strategies against a. baumannii.