جداسازی و شناسایی مولکولی سودوموناس مقاوم به حرارت تولید کننده آلفا آمیلاز قلیایی از پسماندهای کارخانجات برنجکوبی شمال کشور

آمیلاز یکی از مهمترین آنزیم ها در صنعت است که کاربردهای متعددی از جمله در صنایع نساجی، غذایی و نانوایی، کاغذسازی، خوراک دام و طیور، شوینده ها و تولید شربت فروکتوز دارد. به طوریکه حدود 25 ٪ از بازار آنزیم جهان را دارا می باشد و آنزیم اصلی در هیدرولیز مولکولهای نشاسته است. این مطالعه نمونه‌های پسماند به صورت تصادفی از صنایع مختلف برنجکوبی و آرد و نان جمع‌آوری و پس از تهیه رقت، نمونه ها بر روی محیط کشت نشاسته آگار غربالگری و سپس از نظر تولید آمیلاز با استفاده از روش دی نیترو سالیسیلیک اسید (dns)مورد بررسی قرار گرفتند. پس از بررسی نهایی باکتری‌های دارای فعالیت آمیلازی با استفاده از روش‌های بیوشیمیایی و سپس با روش ملکولی با تکثیر ژن 16s rdnaشناسایی شدند. نتایج نشان دادند از بین 55 سویه جداشده اکثرا متعلق به جنس سودوموناس و یک سویه دارای خصوصیات منحصر به فرد و توانایی رشد در دمای بالای 50 درجه سانتیگراد و ph های قلیایی 8 را داشته و دارای فعالیت تولید آنزیمی0.21 میکرومول بر دقیقه می باشد. نمونه جداشده از صنایع برنج کوبی با 87/99 درصد تشابه بیشترین شباهت را به ژن 16s rdna stutzerimonas stutzeri strain pshb1 را داشت. این باکتری‌ پتانسیل بالایی برای استفاده در فرآیندهای صنعتی دارند. بنابراین در ادامه با بهینه سازی شرایط تولید آمیلاز توسط این سویه و یا کلون کردن ژن این آنزیم در سایر سویه ها، میتوان آنها را برای تحقیقات بیشتر جهت تولید صنعتی این آنزیم را پیشنهاد داد.

isolation and molecular identification of heat-resistant pseudomonas producing alkaline alpha-amylase from rice mill waste in northern iran

amylase is one of the most important enzymes in industry, with multiple applications including textile, food, and baking industries, paper production, animal and poultry feed, detergents, and fructose syrup production. this study involved the random collection of waste samples from various rice milling, flour, and bread industries. after preparing dilutions, the samples were screened on starch agar plates to evaluate amylase production using the dinitrosalicylic acid (dns) method. following the final assessment, amylase-producing bacteria were identified through biochemical methods and subsequently confirmed using molecular methods by amplifying the 16s rdna gene. results revealed that of the 55 isolated strains, most belonged to the genus pseudomonas, with one strain exhibiting unique characteristics, including the ability to grow at temperatures above 50 c and alkaline ph levels of 8, demonstrating an enzymatic activity of 0.21 µmol per minute. the strain isolated from rice milling industries showed a 99.87% similarity to the 16s rdna gene of stutzerimonas stutzeri strain pshb1. this bacterium holds high potential for industrial applications. therefore, further optimization of amylase production conditions using this strain, or cloning the gene of this enzyme in other strains, could be suggested for additional research towards the industrial production of this enzyme.