ارزیابی کشت در دمای پایین به عنوان یک روش کارآمد در جداسازی سویه‌های مخمری از نمونه‌های محیطی کوه سری توچال

مخمرها زیستگاه های متنوعی از کره خاکی را در بر می گیرند که بسته به نوع سوبستری غذایی و پارامترهای محیطی نوع سویه های مخمری استقرار یافته متفاوت بوده و آنها را بشکل بومی یا غیر بومی و گاه جمعیت غالب مخمری به تصرف خود در می آورند. روش های مختلفی جهت جداسازی مخمرها گزارش شده است که می توان از بگارگیری آنتی بیوتیک های ضد باکتریایی و ضد کپکی نام برد. علاوه بر جلوگیری و مهار رشد جمعیت باکتریایی و کپکی، کارآمد سازی روش در جداسازی اکثریت سویه های قابل کشت حائز اهمیت است. در این تحقیق اقدام به بکارگیری روش کشت در دمای پایین و مقایسه آن با روش معمول در دمای 20 درجه سلسیوس جهت بازیابی جدایه های مخمری گردید. ابتدا نمونه های محیطی کوه سری توچال پس از نمونه برداری توسط استوانه های پلاستیکی استریل درون میکروتیوب ها خرد و پس از تهیه سریال رقت در شرایط یکسان در چند تکرار با میله شیشه ای سرکج بر روی محیط آگاردار کشت مخمری پخش و در دمای 10 و 20 درجه سلسیوس کشت داده شدند. نتایج بیانگر تنوع قابل توجه و بالاتر گونه ای جدایه ها در دمای پایین تر بوده که این موضوع با استفاده از استخراج dna ژنومی و تکثیر ژن ریبوزومی و توالی یابی مورد تایید قرار گرفت. این افزایش بازیابی جدایه های مخمری عمدتا از رشد کنترل شده تر ریسه های کپکی در محیط کشت با کاهش اثر منفی پوششی و یا مهار کنندگی بر سویه های مخمری موجود در نمونه محیطی ناشی می گردد.

evaluation of low temperature cultivation as an efficient method in isolation of yeast strains from environmental samples of alpine region of tochal

depending on the type of substrate and environmental parameters, yeasts occupy diverse habitats on the earth so the types of established yeast strains can be different as autochthonous or allochthonous form and sometimes dominant yeast population. various methods have been reported for the isolation of yeasts, including the use of antibacterial and antifungal antibiotics. in addition to preventing and inhibiting the growth of bacterial and mold populations, it is important to make the method more efficient in isolating the majority of cultivable strains. in this research, low temperature cultivation method was used and compared with the usual method at 20 degrees celsius to recover yeast isolates. first, the environmental samples of alpine tochal were crushed by sterile plastic cylinders in microtubes, and after serial dilutions were prepared in the same conditions in several replicates spread with a glass rod on solid yeast culture at temperatures 10 and 20 degrees celsius cultivation. the results showed significant and higher species diversity recovery of the isolates at lower temperature, which was confirmed by using genomic dna extraction and ribosomal gene amplification and sequencing. this increase in the recovery of yeast isolates is mainly due to the more controlled growth of mold filaments in the culture medium with reducing negative covering or inhibitory effect on the yeast strains present in the environmental sample.