تولید اقتصادی آنزیم پکتیناز از تفاله سیب توسط bacillus wiedmannii

آنزیم های پکتینولیتیک یکی از گروه های مهم آنزیم های مورد استفاده در صنعت فرآوری وشفاف سازی آبمیوه ها هستند. از کاربرد های پکتینازها میتوان صنعت نساجی، صمغ زدایی محصولات الیافی، تولید کاغذ، تخمیر قهوه و چای، استخراج روغن و تصفیه فاضلاب اشاره کرد. هدف از این پژوهش جداسازی گونه های بومی باسیلوس از خاک مزرعه سیب و بررسی توانایی تولید آنزیم پکتیناز در آن ها است. در این تحقیق، 5 نمونه خاک از مزرعه سیب شهرستان دماوند جمع آوری شد و جداسازی به روش پورپلیت و تیمار حرارتی صورت گرفت. به منظور انجام روش غربالگری اولیه بر روی محیط کشت اختصاصی پکتین آگار به صورت کشت نقطه ای کشت داده شد.پس از مشاهده هاله آنزیمی،روش چاهک گذاری انجام شد.رنگ آمیزی گرم و دیگر تست های بیوشیمیایی انجام شد .سپس با استفاده از نمونه منتخب، روش سنجش کمی آنزیم دی نیتروسالیسیلیک اسید و بهینه سازی انجام شد.در این تحقیق ،از میان 61 گونه باسیلوس ،6 گونه در مرحله غربالگری اولیه ،3 گونه در مرحله ثانویه بیشترین قطر هاله را داشتند. گونه باسیلوس با قطر هاله 20 میلی متر به عنوان بهترین تولید کننده آنزیم انتخاب شد.در بهینه سازی ،منبع کربن ارزان قیمت تفاله سیب با میزان تولید آنزیم 4/86 واحد در میلی لیتر و منبع نیتروژن پپتون با میزان تولید آنزیم 5/94 واحد در میلی لیتر دارای بالاترین میزان تولید آنزیم بوده اند.جدایه مجهول با 100 درصد تشابه مربوط به باسیلوس ویدمانی است. از پتانسیل سویه های باکتری جداسازی شده بومی کشورمان در جهت تولید آنزیم های صنعتی مانند پکتیناز، با استفاده از ترکیبات ارزان قیمت مانند تفاله سیب میتوان به میزان مناسبی از تولید آنزیم پکتیناز دست یافت و این مطالعه میتواند دستاوردی در جهت جایگزینی آن با سوبستراهای گران قیمت در صنعت باشد.

economic production of pectinase enzyme from apple pomace by bacillus wiedmannii

pectinolytic enzymes are one of the important groups of enzymes used in the processing and clarification industry of fruit juices. the applications of pectinases can be mentioned in the textile industry, degumming of fiber products, paper production, coffee and tea fermentation, oil extraction, and wastewater treatment. the purpose of this research is to isolate native species of bacillus from apple farm soil and investigate the ability to produce pectinase enzyme in it. in this research, 5 soil samples were collected from an apple farm in damavand city, and separation was done by porplate method and heat treatment. in order to perform the primary screening method, it was cultured on a special pectin agar culture medium as a spot culture. after observing the enzyme halo, the welling method was performed. gram staining and other biochemical tests were performed. then, using the selected sample, the quantitative enzyme assay by dinitrosalicylic acid (dns) method and optimization was performed. in this research, from among the 61 bacillus species, 6 species had the largest halo diameter in the primary screening stage and 3 species in the secondary stage. bacillus species with a halo diameter of 20 mm was selected as the best enzyme producer.in the optimization, the cheap carbon source of apple pomace with the enzyme production rate of 86.4 iu/ml and the nitrogen source of peptone with the enzyme production rate of 94.5 iu/ml have the highest enzyme production rate. unknown separation with 100% the similarity is related to bacillus wiedmannii. from the potential of the isolated native bacterial strains of our country to produce industrial enzymes such as pectinase, by using cheap ingredients such as apple pomace, a suitable amount of pectinase enzyme production can be achieved and this study can be an achievement in to replace it with expensive substrates in the industry.