میزان بیان lncrnaهای gas5، neat1 و sra در سلول‌های mcf-7 ترانسفورم شده با وکتور نوترکیب حامل ژن انتروتوکسین b استافیلوکوکوس اورئوس تغییر می یابد

زمینه و هدف : سرطان سینه یک بیماری ژنتیکی است که حدود 5 تا 10 درصد احتمال دارد به ارث برسد. این بیماری به عنوان رایج ترین نوع سرطان بعد از سرطان پوست در زنان می باشد. مطالعات اخیر نشان داده است که در افراد مبتلا به بیماری سرطان، بیان lncrna ها کاهش و یا افزایش بیان دارا هستند. هدف از این تحقیق بررسی اثرات ژن seb باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بیان lncrnaهای gas5، neat1 و sra در سلول های mcf-7 ترانسفورم شده با وکتور نوترکیب pcdna3.1(+)-seb به روش real time rt-pcr می باشد.مواد و روش ها: پلاسمید نوترکیب حاوی ژن seb به روش شوک حرارتی وارد باکتری e.coli سویه top10 شد و سپس تخلیص شد . وکتور نوترکیب به روش لیپوفکشن وارد سلول های mcf-7 شد و غربالگری توسط آنتی بیوتیک نئومایسین (600 میکروگرم در میلی لیتر) انجام گرفت. استخراج rna و سنتز cdna از سلول های ترانسفکت شده انجام شد. در نهایتreal time rt-pcr به ‌منظور بررسی تغییر بیان lncrna های نامبرده انجام شد.نتایج: پس از انجام واکنش لیپوفکشن، سلول هایی که پلاسمید نوترکیب را دریافت کرده بودند در محیط کشت حلوی نئومایسین رشد کردند. پس از استخراج rna و سنتز cdna، واکنش real time rt-pcr انجام گرفت و تغییر بیان lncrna های مربوطه تایید شد. بیان lncrna های sra و neat1 به طور معنی داری نسبت به گروه شاهد کاهش و gas5 افزایش داشته اند. نتیجه گیری: ژن سم seb موجب اثرات ضد سرطانی می گردد و با توجه به تغییر بیان lncrnaهای ذکر شده به نظر می-رسد سلول را به سمت آپوپتوز هدایت می کند.

the expression levels of lncrnas gas5, neat1 and sra are changed in mcf-7 cells transfected with staphylococcus aureus seb gene were changed

background: breast cancer is a genetic disorder that can be inherited from about 5 to 10 percent. this disease is the most common type of cancer after skin cancer in women. the purpose of this study was to investigate the effects of seb gene expression on the expression of gas5, neat1 and sra lncrnas in mcf-7 cells transfected with the new vector pcdna3.1(+)-seb via real time rt-pcr method.materials and methods: the recombinant plasmid containing seb gene was introduced into the e. coli strain of top10 by thermal shock method and then purified. the recombinant vector was introduced into the mcf-7 cells by lipofection method and screening was done by neomycin antibiotic. extracting rna and synthesizing cdna from transfected cells was performed. finally, real time rt-pcr was performed to investigate the change of expression of these lncrnas.results: the change of expression of relevant lncrnas was confirmed. the expression of sra and neat1 significantly decreased in comparison with the control group and gas5 increased.conclusion: the results indicate that the seb enterotoxin gene causes anticancer effects and leads the cell to apoptosis.