بررسی القای آپوپتوز توسط ژن کد کننده سم sehباکتری استافیلوکوکوس اورئوسدر سلول های pc3

زمینه و هدف: در این تحقیق، تاثیر سم seh باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بر میزان آپاپتوز در رده سلولی pc-3 در سرطان پروستات انجام گرفت. seh یکی از اعضای سموم مهم باکتریایی است. bcl-2و bax دو پروتئین مداخله کننده در مسیر داخلی آپوپتوز و survivin به عنوان عملکرد دوگانه آن هم به عنوان مهار کننده آپوپتوز و هم تنظیم کننده میتوز، شناخته شده است.مواد و روش ها: در این تحقیق توالی ژن سم از طریق سایت ncbi به دست آمد و در وکتور pcdna3.1(+) کلون شد. وکتور نوترکیب به درون باکتری e. coli سویه top10 به کمک شوک حرارتی منتقل شد. سلول های رده pc-3 تهیه شده از انستیتو پاستور با وکتور نوترکیب به روش لیپوفکشن ترانسفورم شد. پس از برداشت سلول ها، rna استخراج و cdna ساخته شد. real time pcr برای بررسی میزان بیان برروی این سلول ها و ژن های آپوپتوزی و یک گروه به عنوان شاهد صورت گرفت. از ژن رفرنس gapdh استفاده شد.نتایج: نتایج حاصل نشان دهنده بیان افزایش ژن bax و کاهش بیان bcl-2 و survivin بود. به صورتی که با تزریق پلاسمید حاوی seh به رده سلولی pc-3 و پس از آن انجام real time pcr و بررسی نتایج آن نسبت به ژن رفرنس، مشخص شد که seh بر روی بیان ژن های آپوپتوزی در رده سلولی pc-3 تاثیر دارد.بحث و نتیجه گیری: سم انتروتوکسین h باکتری استافیلوکوکوس می تواند اثرات مفیدی بر بیان ژن های آپوپتوزی در سرطان پروستات داشته باشد. به صورتی که بیان ژن های آنتی آپوپتوتیک مثل bcl-2 و survivin راکاهش، و بیان ژن bax را افزایش دهد.

investigation of induction of apoptosis by she venom coding gene of staphylococcus aureus pc-3 cell

prostate cancer is one of the most common cancers among men to show certain symptoms prior to metastasis. therefore, proper diagnosis and early detection in disease control and selection of therapeutic methods are important. in this study, the effect of staphylococcus aureus was performed by staphylococcus aureus on the pc – 3 cell level.materials and methods:in this study, the sequence of the venom gene was obtained through the ncbi site and cloned into the vector pcdna3.1 (+). the recombinant vector was transferred to e. coli strain top10 with thermal shock. pc-3 cells prepared from the pasteur institute with a recombinant vector transfected with lipofection. after removal of the cells, the rna and cdna rna was constructed. real-time rt-pcr for expression of these cells and apoptotic genes and one group as control. reference gapdh gene was used.result: the results showed that in seh-treated pc3 cell lines, the expression of bax gene was increased statistically significant (p<0.05) in compared to control pc3 cell lines (transfected by empty pcdna3.1(+)). as well, the reduces of bcl-2 expression was observed in pcdna3.1(+)-seh transfected cells in compare with control group. so, these finding showed that changing in mrna expression of bcl-2 and bax genes support cell apoptosis. conclusion: seh toxin of s. aureus has useful effects on the expression of bax gene as a pro-apoptotic factor. on the other hand, anti-apoptotic bcl-2 gene was down-regulated after seh toxin treatment of pc3 cancer cell lines. so, it seems that the seh toxin of s. aureus has a high potential for cancer treatment.