جداسازی استرپتومایسس های خاکزی تولید کننده مواد ضد میکروبی به کنترل اشرشیا کلای مقاوم به جنتامایسین از جنگل بناب و پارک ملی بختگان

سابقه و هدف: عفونت‌های دستگاه ادراری یکی از شایع ترین عفونت‌های باکتریایی است. اشرشیاکلی ارگانیسمی است که در اکثر بیماران باعث عفونت ادراری می‌شود. مقاومت دارویی زیادی گزارش شده است، متاسفانه مقاومت دارویی به جنتامایسین در حال افزایش است. محققان به دنبال جایگزینی برای داروهای رایج هستند. یکی از جایگزین‌های مناسب متابولیت‌های تولید شده از استرپتومایسس هستند. استرپتومایسس‌ها باکتری‌های رشته ای هستند که از خاک و آب جدا می شوند. برخی از گونه‌های آن‌ها می‌توانند آنتی‌بیوتیک‌ها یا متابولیت‌های دیگری ترشح کنند که باعث از بین رفتن یا مهار رشد سایر عوامل بیماری‌زا می‌شود. در این مطالعه ما در حال غربالگری استرپتومایسس‌هایی بودیم که دارای اثر ضد میکروبی بر باکتری اشرشیاکلی مقاوم به جنتامایسین از دریاچه بختگان بودند.مواد و روش‌ها: برای جداسازی استرپتومایسس، نمونه‌ها به روش رقت‌سازی و کشت در نشاسته کازئین آگار مورد یررسی قرار گرفتند و در دمای 28 درجه سانتی‌گراد به مدت 7 روز انکوبه شدند. کلنی‌های گچی و پودری شکل شناسایی شدند. برای جداسازی و خالص سازی باکتری و متابولیت تولید شده، باکتری‌های جدا شده در محیط isp2 در دمای 28 درجه سانتی گراد و 150 دور در دقیقه به مدت 7 روز در انکوباتور شیکر دار کشت داده شدند. سپس سانتریفیوژ شده و به همان حجم، اتیل استات اضافه شد و در دمای 28 درجه سانتی گراد به مدت 5 ساعت انکوبه شد. سپس مایع به قیف جداکننده منتقل شد. فاز رویی به دستگاه تقطیر منتقل شد. این مایع برای آزمایشات ضد میکروبی استفاده شد. مقاومت به جنتامایسین و سایر آنتی بیوتیک‌های رایج از 50 بیمار منتخب مورد بررسی قرار گرفت. سپس متابولیت‌های جدا شده از استرپتومایسس به روش دیسک دیفیوژن بر روی این باکتری‌ها مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت، استرپتومایسس‌ها توسط 16srrna شناسایی شدند.یافته ها: 17 استرپتومایسس از دریاچه بختگان جدا شد. یکی از آن‌ها اثر ضد میکروبی نشان داده است. قطر هاله بدون رشد 1.24±19 بود، نتایج حاصل از 16srrna نشان می‌دهد که این باکتری 9/99٪ شبیه بهstreptomyces streptomyces sp است. سویه 11k402.بحث و نتیجه گیری: استرپتومایسس‌ها توانایی بالایی در تولید متابولیت‌های ضد میکروبی را دارند. با جداسازی و خالص سازی این متابولیت‌ها می‌توان از آن‌ها به عنوان جایگزینی برای آنتی‌بیوتیک‌ها و داروهای عوامل رایج استفاده کرد.

isolation of soil streptomyces with antimicrobial effect on gentamicin resistance escherichia coli, from bonab forest and bakhtegan nation park

background: urinary tract infections are one of the most clinical bacterial infections. escherichia coli is the organism that causes utis in most patients. many drugs resistance has been reported, unfortunately, drug gentamicin resistance increasing. researchers are looking for alternative to replace common drug. one of alternatives are the metabolites produced from streptomyces. streptomyces are filamentous bacteria that isolation from soil and water. some species of them can secretion antibiotics or other metabolites that kill or inhibit the growth of other microorganism. in this study we were screening for streptomyces that had antimicrobial effect on gentamycin resistance e. coli, from bakhtegan lake.materials and methods: for isolation of streptomyces samples were tested by serial dilution method and culture in starch casein agar then incubated in 280c for 7 days. gypsum and powder colonies were detected. for metabolite produced isolated bacteria were cultured in isp2 broth in 28 0c and 150 rpm for 7 days. then centrifuged and the same volume, ethyl acetate was added and incubated in 280c for 5h. then liquid transferred to separator funnel. the supernatant phase was transferred to distiller. this liquid used for antimicrobial tests. resistance to gentamicin and other common antibiotics was studied from 50 selected patients. then, the isolated metabolites from streptomyces were examined by disc diffusion method on these bacteria. finally, streptomyces were identified by 16srrna.results: 17 streptomyces were isolated from bakhtegan lake. one of them has shown antimicrobial effect. the diameter of the non-growth zone was 19±1.24, results from 16srrna indicate bacteria is 99.9% similar to streptomyces streptomyces sp. strain 11k402. conclusion: streptomyces have high ability to produce antimicrobial metabolites. by purification and formulation these metabolites, they can be used of them as an alternative to common antibiotics or antiagents.