بررسی اثرات ژن alpha toxin باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بر بیان ژن های bcl-2،bax و survivin در سلول های mcf-7

زمینه و هدف : سرطان در نتیجه تقسیم غیرقابل‌کنترل سلول‌ها، و در اثر عوامل محیطی و اختلال‌های ژنتیکی به وجود می‌آید. تومور مجموعه‌ای از سلول‌هاست که به دلیل رشد و تقسیم خارج از کنترل آن‌ها ایجاد می‌شود . مرگ سلولی یک مکانیسم یا مجموعه‌ای از وقایع برنامه‌ریزی‌شده‌ی ژنتیکی می‌باشد که طی آن سلول به خودکشی واداشته می‌شود. هدف از انجام این پژوهش بررسی تغییر بیان ژن های آپوپتوزی بعد از تیمار سلول سرطان سینه باسم آلفا توکسین می باشد.مواد و روش ها: پلاسمید نوترکیب حاوی ژن alpha toxin به روش شوک حرارتی وارد باکتری e.coli سویه top10 شد و پس از تکثیر ، پلاسمید نوترکیب استخراج شد . سلول‌های mcf-7 مراحل کشت آن‌ها انجام شد و آماده‌سازی آن‌ها صورت گرفت. سپس مراحل لیپوفکشن به‌منظور واردکردن پلاسمید به این سلول‌ها انجام شد و پس از غربال‌گری توسط آنتی‌بیوتیک نئومایسین آماده استخراج rna شدند. سپس استخراج rna انجام شد و cdna توسط کیت یکتا تجهیز آزما سنتز شد و درنهایت real time rt-pcr به‌منظور بررسی تغییر بیان ژن های bcl-2، bax و survivin انجام شد.نتیجه گیری : بیان ژن alpha toxin در سلول‌های سرطان سینه در رده mcf-7 سبب کاهش بیان ژن آنتی آپوپتوزی bcl-2 همچنین افزایش بیان ژن پروآپوپتوزی bax و کاهش بیان ژن آنتی آپوپتوزی survivin می‌شود که درنهایت منجر به القای آپوپتوز و حذف توده توموری می‌شود.

investigating the effects of staphylococcus aureus alpha toxin gene on the expression of bcl-2, bax and survivin genes in mcf-7 cells

background and objective: uncontrolled cell division, in addition to genetic disorders and environmental factors, can lead to cancer. a tumor is a group of cells that result from uncontrolled cell growth and division. cell death is a process or sequence of genetically predetermined events that force a cell to die. this study aims to look into the changes in apoptotic gene expression following alpha-toxin treatment of breast cancer cells.materials and methods: e. coli strain top10 was inoculated with a recombinant plasmid carrying the alpha toxin gene using the heat shock method. following multiplication, the recombinant plasmid was removed. the mcf-7 cells were produced and cultivated. following the insertion of the plasmid into these cells via lipofection, they were screened with the antibiotic neomycin and prepared for rna extraction. after rna extraction and cdna synthesis using the yekta tehiz azma kit, real-time rt-pcr was carried out to look at changes in the expression of the bcl-2, bax, and survivin genes.conclusion: the expression of the alpha toxin gene in mcf-7 breast cancer cells results in the induction of apoptosis and the removal of the tumor mass by decreasing the expression of the anti-apoptotic gene bcl-2, increasing the expression of the pro-apoptotic gene bax, and decreasing the expression of the anti-apoptotic gene survivin.