بیان lncrna های ghet1 و ccat1 در سلول های ags ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب حامل ژن کد کننده سم tsst-1 استافیلوکوکوس اورئوس تغییر می کند

مقدمه و هدف : سرطان معده سومین عامل مرگ و میر به وسیله ی بیماری سرطان در سراسر جهان می باشد. اکثر افرادی که به سرطان معده مبتلا می شوند تا مرحله ی پیچیده شدن بیماری پیش می روند و در این مرحله سرطان تشخیص داده می شود. lncrna ها جز rna های تنظیمی سلول هستند. طیف وسیعی از شواهد نشان می دهد که نقش اصلی lncrna، هدایت کمپلکس های اصلاح کننده کروماتین در برابر تغییرات اپی ژنتیکی می باشد. هدف از این تحقیق بررسی اثرات ژن سم tsst-1 باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بر بیان lncrnaهای ghet1 و ccat1 در سلول های ags ترانسفرم شده با وکتور نوترکیب pcdna3.1(+)-tsst-1 به روش real time rt-pcr می باشد.مواد و روش ها: پلاسمید نوترکیب حاوی ژن tsst-1 به روش شوک حرارتی وارد باکتری e.coli سویه top10 شد و سپس تخلیص شد . وکتور نوترکیب به روش لیپوفکشن وارد سلول های ags شد و غربالگری توسط آنتی بیوتیک نئومایسین انجام گرفت. استخراج rna و سنتز cdna از سلول های ترانسفکت شده انجام شد. در نهایت real time rt-pcr به‌منظور بررسی تغییر بیان lncrna های نامبرده انجام شد.نتایج: نتایج حاصل از این تست حاکی از آن می باشد که پس از واکنش لیپوفکشن، سلول های ags در محیط حاوی آنتی-بیوتیک نئومایسین رشد کردند. پس از استخراج rna و سنتز cdna، واکنش real time rt-pcr انجام شد. نتایج گویای این مطلب بود که پس از بیان سم tsst-1 درون سلول های سرطانی، بیان lncrnaهای ccat و ghet1 کاهش معنی داری یافتند.نتیجه گیری : با توجه به کاهش بیان lncrna های مورد مطالعه می توان اینگونه نتیجه گرفت که ژن سم tsst-1 موجب اثرات ضد سرطانی می گردد و سلول را به سمت آپوپتوز هدایت می کند.

the expression of ghet1 and ccat1 lncrnas changes in ags cells transfected with the recombinant vector carrying the staphylococcus aureus tsst-1 gene

background: gastric cancer is the third leading cause of death worldwide due to cancer. most people who develop gastric cancer are progressing to the complex stage of the disease, and cancer is detected at this stage. the purpose of this study was to investigate the effects of tsst-1 gene expression on ghet1 and ccat1 lncrna expressions in ags cells transfected with a new vector of pcdna3.1 (+) - tsst-1 in real time rt-pcr.materials and methods: the recombinant plasmid containing tsst-1 gene was introduced into the e. coli strain of top10 by thermal shock method and then purified. the recombinant vector was introduced into the ags cells by lipofection technique and screening was done by neomycin antibiotics. extracting rna and synthesizing cdna from transfected cells. finally, real time rt-pcr was performed to investigate the change of expression of these lncrnas.results: the results of this test indicate that after expression of tsst-1 toxin within cancer cells, the expression of ccat1 and ghet1 lncrna expression decreased significantly.conclusion: the results indicate that the tsst-1 toxin gene leads to anticancer effects and directs the cell to apoptosis.