شناسایی و جداسازی سویه های مزرعه ای بروسلوز از سویه واکسنrev.1 با استفاده از روش pcr-rflp

بروسلوز از شایع ترین بیماری های مشترک بین انسان و دام است که ضررهای اقتصادی زیادی به صنعت دامپروری وارد می-کند. با وجود اجرای فشرده برنامه های واکسیناسیون برای کنترل بروسلوز در صنعت دامپروری، شناسایی و تمایز بین سویه-های مزرعه ای و سویه واکسن بروسلا با محدودیت هایی روبه رو می باشد. لذا توسعه ابزارهای تشخیصی مولکولی برای تشخیص و تمایز بین سویه های مختلف بروسلوز ضروری است. هدف از انجام پژوهش کنونی استفاده از روش pcr-rflp برای شناسایی و تمایز بین سویه های مزرعه ای و سویه واکسن rev.1 می باشد. برای تحقق این هدف از ژن omp2 بروسلا به عنوان جایگاهی از دو نسخه تکراری تقریباً همولوگ استفاده شد. این جایگاه در بین گونه‌ها و بیوتیپ‌های بروسلا از نظر حضور یا عدم حضور سایت psti متفاوت می باشد. تعداد 174 نمونه خون گوسفند با استفاده از روش تست رزبنگال مورد بررسی شدند که از این تعداد، 36 مورد با نتیجه مثبت همراه بودند. در ادامه نمونه های مثبت با استفاده از روش pcr-rflp مورد بررسی تکمیلی قرار گرفتند. نتایج پژوهش کنونی نشان داد که روش pcr-rflp، روشی سریع، دقیق و کاربردی جهت تمایز بین سویه های مزرعه ای و سویه واکسن rev.1 می باشد.

The Identification and isolation of field strains of brucellosis from vaccine strain Rev1 by using PCR RFLP method

Brucellosis is one of the most common diseases between humans and animals, which causes high economic losses to the livestock industry. Despite the intensive implementation of vaccination programs to control brucellosis in the animal livestock industry, identification and differentiation between field strains and the Brucella vaccine strain is difficult. Therefore, it is necessary to develop molecular diagnostic tools to detect and distinguish between different strains of brucellosis. The purpose of this study is to use the PCR-RFLP method to identify and differentiate the field strains from the Rev.1 vaccine strain. To achieve this goal, the Brucella omp2 gene was used as a locus of two almost homologous duplicates. This position differs among Brucella species and biotypes in terms of the presence or absence of the PstI site. 174 blood samples of sheep were analysed using the Rose Bengal test method, of which 36 were positive. In the following, the positive samples were further investigated using the PCR-RFLP method. The results of the present study showed that the PCR-RFLP method is a fast, accurate, and practical method for distinguishing between the field strains and the Rev. 1 vaccine strain.