طراحی و ساخت ناقل نوترکیب crispr ژن parva در سرطان ریه

پروتئین های parvin یک گروه از پروتئین های آداپتور هستند که واکنش اینتگرین ها و اکتین سیتواسکلتون ها را تسهیل میکنند و به سه گروه آلفا بتا و گاما تقسیم میشوند. همچنین پروتئین های parvin با پروتئین های اکتین باندینگ و تنظیمی شامل پاکسیلین integrin linked kinase و تنظیم کننده های rho gtpase , واکنش می دهند بنابراین نقشی مهم در پروسه های وابسته به اکتین شامل تنظیم شکل و اندازه ی سلول و مهاجرت سلول ایفا میکند. parvin آلفا یک تنظیم کننده ی مهم رگزایی است . سیستم crispr یک تکنولوژی قدرتمند ویرایش ژنوم است که تغییرات گوناگونی را در سطح ژنوم که شامل اصلاح روشن و خاموش کردن ژن را با هدف ایجاد انواع مدل‌های سلولی حیوانی دارویی و ژن درمانی میباشد امکان پذیر ساخته است. هدف از انجام پروژه ایجاد تغییرات حذفی در ابتدای ناحیه ی core promoter آنکوژن parva در سرطان ریه با استفاده از سیستم crispr بود. الیگونوکلئوتیدهای طراحی شده با استفاده از سایت atum پس از دورشته ای شدن و اتصال به وکتور خطی شده کریسپر به سلول های میزبان e.colidh5α منتقل شدند. نتایج یافته ها با استفاده از ژل الکتروفورز و آزمایش pcr بررسی شدند. آنالیز ژل‌ الکتروفورز تشکیل حالت دورشته‌ای grna و آزمایش pcr همسانه سازی موفقیت‌آمیز آنکوژن parva را در ناقل بیانی کریسپر به اثبات رساند. با ساخت ناقل نوترکیب crispr و ایجاد تغییرات اصلاحی دقیق در ژنوم با اهدافی از قبیل تخریب آنکوژن ها و ژن درمانی میسر می گردد.