اثر مهاری عصاره گیاه artemisia quttensis بر روی پمپ افلاکس nora سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده از روش اتیدیوم بروماید و real time pcr

زمینه و هدف: یکی از مکانیسم های مقاومت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین در سویه های استافیلوکوکوس اورئوس، وجود پمپ افلاکس nora می باشد و یافتن ترکیبات طبیعی گیاهی با قابلیت مهار پمپ های افلاکس نیز یکی از چالش های اخیر است. هدف از این مطالعه، تعیین اثر مهاری عصاره گیاه درمنه از گونه artemisia quttensis بر روی پمپ افلاکس nora در سویه های مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس بود. روش بررسی: ابتدا عصاره گیاه a. quttensis با استفاده حلال اتانولی تهیه گردید. سپس با استفاده از روشpcr ، وجود پمپ افلاکس nora در 10 سویه بالینی مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس مشخص شد. همچنین، میزان تاثیر ضدپمپ افلاکسی عصاره به وسیله روش اتیدیوم بروماید بررسی گردید. در نهایت، پس از تیمار سویه ها با غلظت زیرحدکشندگی (submic) عصاره، میزان بیان ژن nora با روش real time pcr ارزیابی شد.یافته ها: نتایج pcr نشان داد تمامی سویه ها دارای پمپ افلاکس nora هستند و روش فنوتیپی اتیدیوم بروماید مشخص کرد عصاره گیاه a. quttensis بر روی تمامی سویه های مقاوم دارای پمپ افلاکس nora، اثر مهاری دارد. همچنین براساس نتایج real time pcr، در غلظت های زیر حد mic عصاره، بیان ژن nora در سویه های مقاوم به سیپروفلوکساسین کاهش داشت.نتیجه گیری: با توجه به اثر ضدپمپ افلاکسی عصاره گیاه درمنه، به نظر می رسد این عصاره می تواند به عنوان گیاه بومی در کشور، پتانسیل استفاده در صنایع دارویی را داشته باشد.

The Inhibitory Effect of Artemisa quttensis Extract on norA Efflux Pump in Ciprofloxacin Resistant Staphylococcus aureus Strains Using Ethidium Bromide and Real-Time PCR Methods

Background and Objectives: norA efflux pump is one of the mechanisms of ciprofloxacin resistance in Staphylococcus aureus strains, and finding natural herbal compounds with the ability to inhibit efflux pumps is one of the recent challenges. The aim of this study was to determine the inhibitory effect of Artemisa quttensis extract on norA efflux pump gene expression in ciprofloxacin resistant S. aureus strains. Methods: At first, A. quttensis ethanolic extract, was prepared by ethanol solvent. Then, existence of norA efflux pump was detected in 10 ciprofloxacin resistant clinical strains of S. aureus using polymerase chain reaction (PCR) method. Moreover, antiefflux activity of the extract was determined using ethidium bromide method. Finally, after treatment of isolates with SubMIC concentration of the extract, norA gene expression level, was evaluated using realtime PCR method. Results: The PCR results showed that all of the strains had norA efflux pump, and and ethidium bromide method revealed that the A. quttensis extract had inhibitory effect on resistant strains that had norA efflux pump. Moreover, realtime PCR results showed that norA gene expression level was downregulated by SubMIC concentrations of the extract in the ciprofloxacin resistant isolates. Conclusion: Considering the antiefflux pump effect of A. quttensis extract, it seems that this extract has the potential to be used as a native plant in pharmaceutical industries.