بررسی اثرات آنتی‌بیوتیک لووفلوکساسین بر میزان بیان ژن‌های آپوپتوز در فولیکول‌های تخمدان موش نژاد nmri در شرایط برون‌تنی و درون‌تنی

زمینه و هدف: لووفلوکساسین یک آنتی‌بیوتیک فلوروکینولون است. مصرف طولانی‌مدت آنتی‌بیوتیک‌ها، از‌جمله آنتی‌بیوتیک‌های فلوروکینولون، باعث تغییرات دیستروفیک در تخمدان‌ها می شود. در این مطالعه، اثرات آنتی‌بیوتیک لووفلوکساسین بر تکوین فولیکول‌های تخمدان و میزان آپوپتوز آن‌ها در شرایط برون‌تنی و درون‌تنی موش‌های سوری نژاد nmri بررسی شد.روش بررسی: در مطالعه برون‌تنی، تخمدان‌های جداسازی شده از حیوانات با غلظت‌های یک، دو، سه و ده میکروگرم بر میلی‌لیتر به مدت شش روز با آنتی‌بیوتیک لووفلوکساسین تحت تیمار قرار گرفتند و در مطالعه درون‌تنی موش‌های ماده در گروه‌های آزمایش با داروی لووفلوکساسین با غلظت‌های صد، دویست، چهارصد و هشتصد میلی‌گرم بر کیلوگرم وزن بدن تحت تیمار قرار گرفتند. پس از 24 روز حیوانات گروه درون‌تنی، کشته شده و نمونه بافت تخمدان تهیه شد. سپس رنگ‌آمیزی ‌هماتوکسیلینائوزین جهت بررسی‌های بافتی و همچنین تکنیک real time pcr جهت بررسی میزان بیان ژن‌های bax و bcl2 برای هر دو گروه انجام شد.یافته‌ها: نتایج مطالعه برون‌تنی نشان داد که دُز دو میکروگرم بر میلی‌لیتر، آپوپتوز را در فولیکول اولیه تک ‌لایه القا کرد. دُزهای پنج و ده میکروگرم بر میلی‌لیتر، روند القای آپوپتوز را در فولیکول اولیه چند لایه افزایش دادند. تعداد فولیکول‌های ثانویه در دُز پنج میکروگرم بر میلی‌لیتر، بیشترین کاهش را داشت در صورتی که تعداد فولیکول بالغ در دُز ده میکروگرم بر میلی‌لیتر بیشترین افزایش را داشت. با افزایش غلظت لووفلوکساسین، بیان ژن bax کاهش و بیان bcl2 افزایش معناداری داشت. در مطالعه درون‌تنی مشاهده شد که تعداد فولیکول‌های اولیه و ثانویه به‌طور معناداری به صورت وابسته به دُز کاهش یافت. تعداد فولیکول‌های آترتیک با افزایش دُز به‌طور معناداری افزایش یافت. با افزایش غلظت لووفلوکساسین در این گروه، بیان هر دو ژن bax و bcl2 افزایش یافت.نتیجه‌گیری: این بررسی نشان می‌دهد که آنتی‌بیوتیک لووفلوکساسین باعث القای آپوپتوز در فولیکول‌های تخمدان می‌شود.

Effects of Levofloxacin on Expression of Apoptosis Genes of Ovarian Follicles in NMRI Mouse in Vitro and in Vivo

Background and Objectives: Levofloxacin is a fluoroquinolone. Longterm use of antibiotics, including fluoroquinolone antibiotics, causes dystrophic changes in the ovaries. In this study, the effects of levofloxacin on the development of ovarian follicles and their apoptosis in the in vitro and in vivo conditions of NMRI Mouse were investigated.Methods: In the vitro study, isolated ovaries of animals were treated with levofloxacin at concentrations of 1, 2, 5, 10 micro;g/ml for 6 days and in the vivo study were treated with levofloxacin at concentrations of 100, 200, 400 and 800 mg/kg. After 24 days, animals were sacrificed in the in vivo groups and ovary samples were obtained. Hematoxylin and eosin (H E) stains for histological studies also Real Time PCR techniques for study of expression rate of Bax and Bcl2 genes were performed in both groups.Results: The results of the in vitro study showed that the dose of 2 mu;g/ml induced apoptosis in the monolayer primary follicles. Doses of 5 and 10 mu;g/ml increased the induction of apoptosis in the multilayer primary follicle. The number of secondary follicles at the 5 mu;g/ml dose had the most decrease. While at the dose of 10 mu;g/ml, the number of mature follicles had the most increase. As the antibiotic concentration increases, the expression of the Bax gene decreases and Bcl2 gene increases significantly. The results of the in vitro study showed that the number of primary and secondary follicles decreased dosedependently. The number of atretic follicles increased significantly with increasing dose. The expression of the Bax and Bcl2 genes increased with increasing levofloxacin antibiotic concentration.Conclusion: This study demonstrates that levofloxacin induces apoptosis in ovarian follicles