بررسی ارتباط بیان ژن mlh1 و فاکتورهای پاتولوژیکی در بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال

زمینه و هدف: ژن mlh1 (mutl homolog 1) عنصر اصلی هترودایمر mutlα بوده و در ترمیم عدم تطابق باز-باز و لوپ حذف و اضافه نقش دارد. هنگاهی که پروتئین mlh1 حضور ندارد، تعداد خطاهایی که تعمیر نشده باقی می مانند، افزایش می یابد و این مهم می تواند منجر به ایجاد تومور در بدن شود. در این راستا، پژوهش حاضر با هدف بررسی کمی بیان ژن mlh1در نمونه خون بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال (crc: colorectal cancer) و ارتباط آن با فاکتورهای مراحل پیشرفت تومور به لایه های دیواره روده (t) و مراحل تهاجم به گره لنفاوی (n) انجام شد.روش بررسی: در این مطالعه نمونه خون 33 بیمار مبتلا به سرطان کلورکتال جمع آوری شد. استخراج rna (ribonucleic acid) و ساخت cdna (complementary dna) مطابق با پروتکل کیت صورت گرفت. پرایمر به روش exon-exon junction طراحی شد و آزمون real time pcr (real-time polymerase chain reaction) برای ژن های mlh1 و β-actin (beta-actin)به صورت سه بار تکرار انجام شد. آنالیز نهایی نتایج با استفاده از نرم افزار rest 2009 صورت گرفت و از آزمون t برای بررسی بیان ژن mlh1و ارتباط آن با فاکتورهای t و n در نمونه های موجود استفاده گردید.یافته ها: نتایج حاصل از real time pcr 33 بیمار با میانگین سنی 55 سال و درصد فراوانی 42.5 زن و 57.5 مرد، کاهش معنادار بیان ژن mlh1 را در مراحل بالای بیماری نشان داد (*0.05>p). همچنین ارتباط کاهش بیان این ژن با فاکتورهای t(*0.05>p) و n (*0.05>p) معنادار بود.نتیجه گیری: بر مبنای نتایج، ارتباط مستقیمی میان کاهش بیان ژنmlh1 و مراحل بالای سرطان کلورکتال مشاهده شد و ارتباط آن با فاکتورهایt و n در تعدادی از بیماران ایرانی مبتلا به سرطان کلورکتال بررسی و تایید گردید.

MLH1 Gene Expression and Pathologic Factors in Iranian Patients with Colorectal Cancer

Background and Objectives: MutL homolog (MLH1) is a key component of heterodimeric complex MutLα;, which recognizes and repairs basebase mismatches or insertion/deletion loops that arise from nucleotide misincorporation. In the absence of MLH1 protein, the number of unrepaired mismatches will increase and cause tumors in organs. The present study aimed at quantitative analysis of MLH1 gene expression and its association with depth of tumor invasion (T) and lymph node invasion (N) factors in blood samples of Iranian patients with colorectal cancer (CRC). Methods: Blood samples from 33 patients with CRC were collected. RNA (Ribonucleic acid) was extracted and cDNA (Deoxyribonucleic acid) was fabricated according to the kit protocol extracted. The primer was designed by the Exon-Exon Junction method, and Real-time Polymerase Chain Reaction (RealTime PCR) test was performed three times for MLH1 and βactin (Betaactin) genes. Data were analyzed in  REST 2009 Software, and a Ttest was used to evaluate the expression of MLH1 gene and its association with T and N factors. Results: The results of RealTime PCR in 33 patients with the male to female ratio of 42.5% to 57.5% and a mean age of 55 years demonstrated a significant decrease in MLH1 gene expression in the late stages of the disease (P>0.05 *). Furthermore, the reduction of expression in this gene was associated with T (P <0.05*) and N factors (P>0.05 *). Conclusion: As evidenced by the obtained results, a direct relationship was observed between decreased expression of MLH1 gene and late stages of colorectal cancer. Moreover, the association of this gene with T and N factors was investigated and confirmed in several Iranian patients with colorectal cancer.