|
|
|
|
تجزیه‌وتحلیل‌های ساختار ثانویه rna و qrt-pcr مرتبط با anti-cd25 car بیان‌شده در رده‌ی سلولی nk-92
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
دهباشی معین ,حجتی زهره ,متولی باشی مجید ,گنجعلی خانی حاکمی مزدک
|
|
منبع
|
مجله دانشگاه علوم پزشكي قم - 1399 - دوره : 14 - شماره : 2 - صفحه:1 -12
|
|
چکیده
|
زمینه و هدف: سلول های t تنظیم کننده ی رخنه کننده در تومور (ti-treg) عملکرد مهمی را در فرار سرطان از سیستم ایمنی اجرا می کنند. در این پژوهش، نسل سوم سازه ی car علیه آنتی ژن cd25 انسانی به عنوان نشانگر زیستی مهم سطح سلول های ti-treg طراحی شده است.روش بررسی: ابتدا سازه ی anti-cd25 car طراحی شد. با استفاده از وب سرور rnafold، ساختار ثانویه rna ارزیابی شد. همچنین با استفاده از وکتورهای لنتی ویروسی، رده ی سلولی nk92 ترابرد شد. سپس سطح بیان rna anti-cd25 car به وسیله qrt-pcr در سلول های nk92 ترابردشده با وکتورهای انتقالی car و تقلیدی و همچنین سلول های تیمارنشده ارزیابی شد.یافته ها: ساختار ثانویه ی rna پایدار بود. همچنین سطح بیان rna anti-cd25 car در سلول های nk92 ترابردشده به وسیله ی وکتور انتقالی pcdh-513b-1-anti-cd25 car به طور معنی داری بیش از سلول های nk92 ترابردشده با وکتور انتقالی تقلیدی و سلول های تیمارنشده بود (p˂0.0001).نتیجه گیری: مطالعه حاضر روی anti-cd25 car rna نشان داد رونوشت های این نوع car پایدار بود و در سطح بالایی بیان شد. درواقع، این نوع car می تواند در آینده همچون ابزاری برای حذف فرار سرطان از سیستم ایمنی در انواع سرطان های جامد و مایع بیشتر بررسی شود.
|
|
کلیدواژه
|
بیولوژی کامپیوتری، بیوانفورماتیک، انفورماتیک، واکنش زنجیره ای پلیمراز در زمان واقعی، anti-cd25 car، ترابرد، فرار تومور ایمنی شناسی
|
|
آدرس
|
دانشگاه اصفهان, دانشکده علوم و فناوری های زیستی, بخش ژنتیک، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی و میکروبیولوژی, ایران, دانشگاه اصفهان, دانشکده علوم و فناوری های زیستی, بخش ژنتیک، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی و میکروبیولوژی, ایران, دانشگاه اصفهان, دانشکده علوم و فناوری های زیستی, بخش ژنتیک، گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی و میکروبیولوژی, ایران, دانشگاه علوم پزشکی اصفهان, دانشکده پزشکی، مرکز تحقیقات نقص ایمنی اکتسابی, گروه ایمنی‌شناسی, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
mghakemi@med.mui.ac.ir
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
RNA secondary structure and qRTPCR analyses pertained to expressed antiCD25 CAR in NK92 cell line
|
|
|
|
|
Authors
|
Dehbashi Moein ,Hojati Zohreh ,Motovali-bashi Majid ,Ganjalikhani-Hakemi Mazdak
|
|
Abstract
|
Background and Objectives: Tumorinfiltrating regulatory T (TITreg) cells perform the significant function in cancer immune escape. In this study, the third generation CAR construct was designed against human CD25 antigen, the significant cell surface biomarker of TITregs.Methods: Initially, the construct of antiCD25 CAR was designed. Using RNAfold web server, the RNA secondary structure was evaluated. Also, utilizing lentiviral vectors, NK92 cell line was transduced. Afterward, the expression level of antiCD25 CAR RNA was assessed by qRTPCR in NK92 cells transduced with CAR and mock transfer vectors and also untreated cells.Results: The RNA secondary structure was stable. Also, the expression level of antiCD25 CAR RNA in transduced NK92 cells by pCDH513B1antiCD25 CAR transfer vector was significantly higher than transduced NK92 cells by mock transfer vector and untreated cells (p˂0.0001).Conclusion: The present study on antiCD25 CAR RNA showed that this type of CAR transcripts were stable and expressed at high level. In fact, this type of CAR can be further studied in the future as a tool to remove the cancer immune escape in all types of solid and liquid cancers.
|
|
Keywords
|
Bioinformatic ,qRTPCR ,antiCD25 CAR ,Transduction ,Cancer immune escape ,qRTPCR ,antiCD25 CAR
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|