زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن ممزوجی m‌l1-stxb دارواش در e. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری

زمینه و هدف: عصاره برگ های دارواش (viscum album l) دارای پروتئین mli از نوع rip2 (پروتئین های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. stxb شیگا توکسین به عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به نام gb3 متصل می گردد که روی اکثر سلول های بدن بیان می شود. در این مطالعه، بیان آنتی ژنml1stxb در e. coli و تولید آنتی بادی آن در موش سوری بررسی گردید.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، پلاسمید puc57 حاوی ژن mli با جایگاه های آنزیمی ndei و sali در وکتور بیانی pet28a(+)stxb، زیرهمسانه سازی شد و به باکتری e. coli سویه bl21(de3) تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان کاست ژنی mlistxb تحت القایiptg انجام گرفت. پس از تخلیص، پروتئین نوترکیب mlistxb به وسیله ستون نیکل کروماتوگرافی در چهار نوبت متوالی به موش های سوری تزریق شد. یافته ها: در این مطالعه، ژن ml1stxb کلون شده در وکتور بیانی pet28a(+)، با واکنش pcr و آنالیز آنزیمی تایید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به وسیله sdspage و لکه گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفت، سپس آنتی بادی تولیدشده از سرم موش جداسازی و با روش تست elisa بررسی گردید.نتیجه گیری: براساس نتایج این مطالعه، پروتئین ml1 دارای خاصیت غیرفعال کننده ریبوزومی و stxb نقش یاوری و حاملی دارد؛ لذا این پروتئین نوترکیب، کاندیدای واکسن علیه سم دارواش شیگلا دیسانتری بوده که از آنتی بادی آن می توان به عنوان شناساگر استفاده کرد.