استخدام تقنیة Multiplex PCRلتشخیص بعض جینات الضراوة لبکتریا Klebsiella sp. المعزولة من مواقع بیئیة مختلفة.

تضمنت الدراسة جمع 399عینة من بیئات مختلفة والتی شملت السریریة والغیر سریریة حیث جمعت 293عینة سریریة(ادرار، جروح،حروق، خروج، قشع) اما الغیرسریریة (التربة والمیاه) فقد کان مجموعها106 عینة خلال الفترة من تشرین الثانی 2014 ولغایة شباط 2015.تـم تشخیص 51 عزلة بکـتیریة تعــود الــى بکتریـــا k. pneumoniaeباستخدام طرق التشخیص المــظهریة والــزرعیة والکیموحیویة وتم تاکید التشخیص باستخدام api20e وباستخدام جهازالفایتکvaitek2 .اظهرت نتائج اخـتبار مقاومــة الـمضادات للعینات الــمعزولة مـن الحالات المرضیة المختلفة والمصادرالبیئیة (التربة،المیاه) لـ12 من المضادات الحیاتیة مـن مختـلف الـمجامیع تباینا فیما بینها بین مقاومة وحساسة لهذه المضادات بینما کانت البکتریا حساسة وبنسبة100% فقط للمضاد الحیوی imipenem.صممت عـدد مـن الــبادئات المتخصصة للــکشف عــن البکتریا بــاستخدام جین ممیز فیها والکشف ایضا عن مقاومتها للمضادات باستخدام تقنیة تفاعــل البلمرة الــتسـلـسلـی الـمتعدد multiplex pcr للکشف عن وجود او غیاب ثمانیة انواع مــن الجینات maga, rmpa ,htra ,uge-1 ,gent-2, blactx ,tera-, stra-2 المشفرة لعوامل الضراوة الرئیسیة لتشخیص k. pneumoniae.واظهرت النتائج وجود تباین فی المحتوى الجینی بین العزلات فقد احتوت 45عزلة بکتیریة على الجین rmpa والذی یمکن ان یتخذ کموشرتشخیصی وفی نفس التفاعل تم الکشف عــن وجودجینات مــقاومة لاربعة مــن المضادات الحیاتیة العائدة الـــى مجامیع مختلفة (stra, tera ,blactx, gent-2) حیث احتوت کل عزلاتk.pneumoniae علــى جین stra. ومــن خلال هـــــذه الدراسة یمکن استثمار تقنیة البلمرة التسلسلیة المتعددة کوسیلة لــتمییز الــبکتریا الــمعزولة مــن مــصادرمـختلفة بصورة دقیقة وتشخیص مقاومتها للمضادات الحیاتیة الشائعة الاستعمال بوقت قصیر وجهد اقل دون الرجوع الى الفحوصات الروتینیة المعروفة.