معتبرسازی روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (hplc ) جهت شناسایی و تعیین مقدار لیزینوآلانین در شیر خشک نوزادان

سابقه و هدف: لیزینوآلانین طی تهیه و فرآوری شیر خشک  در اثر حرارت، ph قلیایی با واکنش حذفی بتا، تشکیل دهیدروآلانین و واکنش با ترکیبات آمین دار ایجاد می‌گردد. در این مطالعه طراحی و معتبر سازی روشی مناسب جهت شناسایی و تعیین مقدار لیزینوآلانین در شیر خشک نوزادان  با استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (hplc) مد نظر قرار گرفت.مواد و روش‌ها: در این پژوهش ابتدا شرایط بهینه hplc  (ستون c18، آشکارساز فلورسانس، مشتق سازی توسط دنسیل کلراید، سرعت جریان فاز متحرک ml/min  9/0، شویش گرادیانت و فاز متحرک شامل بافر فسفات  7=ph  و استونیتریل) تعیین شد. بر اساس شرایط فوق روش معتبر سازی گردید و کارآمدی روش معتبر شده با آنالیز 10 نمونه شیر خشک بررسی شد.یافته‌ها‌: نمودار کالیبراسیون در محدوده غلظتی 80- 5  میلی‌گرم بر لیتر، خطی بود. ضریب همبستگی 9949/0= r2 به دست آمد. حد تشخیص (limit of detection) mg/l2 و حد تعیین مقدار (limit of quantification)mg/l 5 و درصد بازیافت (recovery) 8/87 _ 7/83 درصد به دست آمد. در ارزیابی دقت روش، انحراف استاندارد نسبی (rsd%) سطح منحنی و غلظت به دست آمده محاسبه شد. برای intra day به ترتیب کمتر از 87/3 و  7/2 درصد و برای inter day  به ترتیب کمتر از 2/5 و 4/7 درصد به دست آمد. در 7 مورد از شیرهای آنالیز شده، لیزینوآلانین شناسایی نشد و در 3 نمونه مقدار آن بینlod, loq  به دست آمد.نتیجه گیری: این روش در جهت تشخیص و شناسایی لیزینوآلانین در شیرخشک نوزادان از دقت، صحت و کارایی لازم برخوردار بوده و در دسترس و مقرون به صرفه می‌باشد.واژگان کلیدی: لیزینوآلانین، شیر خشک نوزادان، کروماتوگرافی مایع باکارایی بالا، آشکارساز فلورسانس، معتبرسازی