استخراج مولکول های اسید ریبونوکلئیک با کیفیت بالا از مغز موش صحرایی با استفاده از یک روش ارزان قیمت

زمینه و هدف: استخراج مولکول های اسید ریبونوکلئیک (rna) با کیفیت بالا از بافت های دارای چربی فراوان مثل مغز یکی از چالش های جدی محققین علوم اعصاب به شمار می رود. به این منظور کیت های تجاری گران قیمتی تولید شده است که بسیاری از محققین به دلیل کمبودهای منابع مالی قادر به استفاده از آنها نیستند. در این مقاله ما یک روش ساده و ارزان قیمت را پیشنهاد می کنیم.روش ‌ها: موش های صحرایی نر نژاد ویستار یک ماهه مورد استفاده قرا گرفتند. حیوانات توسط کلروفورم بیهوش شده و سپس هیپوکمپ مغز آن ها خارج گردید. rna کل بافت مغز توسط کیت rnxplus شرکت سیناکلون استخراج شد. کیفیت rna استخراج شده با تهیه طیف جذبی مولکول با استفاده از اسپکتروفوتومتر نانودراپ و اندازه گیری نسبت های جذبی 260/280 و 260/230 ارزیابی شد.یافته ها: میانگین وزن هیپوکمپ های جدا شده 1/2 ±60/2 میلی گرم بود. میانگین نسبت جذبی 260/280 برابر با 0/02 ± 1/88 و میانگین نسبت جذبی 260/230 برابر با 0/02 ± 1/9 بود. الکتروفورز ژل آگارز نشان داد که rna های ریبوزومی 28s و 18s وجود داشته و rna استخراج شده کیفیت خوبی دارد. همچنین میانگین غلظت rna کل استخراج شده از نمونه ها 608 نانوگرم در میکرولیتر بود. نتیجه ‌گیری: نتایج نشان دادند که با استفاده از روشی ارزان قیمت، امکان استخراج مولکول های rna با کیفیت بالا از بافت مغز امکان پذیر است. از این رو پروتکل ارائه شده در این مطالعه به محققین نوروبیولوژی مولکولی توصیه می شود.

Extraction of high quality ribonucleic acid molecules from the rat brain by means of an inexpensive method

Background and aim: Extraction of high quality ribonucleic acid (RNA) molecules from the high fat tissues such as brain has been a great challenge for neuroscience researchers. Expensive kits have been developed to overcome this challenge. However, many researchers are unable to use due to lack of financial resources. In this study a simple and inexpensive method is suggested.Methods: One month old male Wistar rats were anesthetized by chloroform and their hippocampus was removed. Total RNA of the brain tissue was extracted by RNXPlus solution from Sinaclon Company. The quality of the extracted RNA was evaluated by Nanodrop spectrophotometer and measuring the 260/280 and 260/230 absorbance ratios.Results: The mean weight of the dissected hippocampi was 60.2 ± 1.2 mg. The mean absorbance ratio of 260/280 and that of 260/230 were obtained 1.88 ±0.02 and 1.9 ±0.03, respectively. The agarose gel electrophoresis indicated presence of the ribosomal RNAs 28s and 18s and the extracted RNA had a good quality. The mean concentration of the extracted total RNA was 608 ng/ mu;l.Conclusion: The results indicate that it is possible to extract high quality RNA molecules from the brain tissue by an inexpensive method. Therefore, the presented protocol is recommended to molecular neurobiologists.