prolonged laboratory maintenance of toxoplasma gondii tachyzoites in co-cultivation with the bovine theileria annulata-infected lymphoblastoids

Background and aims: in most of the studies, toxoplasma gondii is maintained in laboratory mice or studied in vitro using non-lymphoid cell lines or primary mouse macrophages. the target of our research was to design a new axenic culture of toxoplasma gondii tachyzoites to providing a sufficient quantity of them.material and methods: theileria annulata-infected lymphoblastoids, which had been maintained up to 260 sub-cultures to attenuate the theileria annulata, were evaluated for their suitability to the cultivation oftoxoplasma gondii tachyzoites. this cultivation process was carried out continuously for up to 10 passages, and after each 5 sub-culture, 0.1 ml ofculture suspension (1×10^6 tachyzoites) was inoculated to each balb/c mouse. results: it was observed that the tachyzoites have attacked the lymphoblastoids, multiplied inside them, and many fresh tachyzoites with typical shape and gliding movement were present in the culture suspension. in all processes of cultivation, the pathogenesis of parasites remained stable, and they were able to proliferate in mice and eventually lead to the death of the animals. conclusions: we describe here a new protocol for prolonged maintenance of tachyzoites of toxoplasma gondii, which is more efficient (both in terms of yield and cost (it does not need fetal calf serum)) than other traditional methods for maintenance of the parasite.

نگهداری طولانی مدت آزمایشگاهی تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گوندی ای در کشت همراه با لنفوبلاستوئیدهای گاوی آلوده شده با انگل تیلریا آنولاتا

زمینه و اهداف: در اکثر تحقیقات ، تاکی زوئیت های انگل توکسوپلاسما گوندی ای در موش های آزمایشگاهی نگهداری شده یا در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از کشت در رده های سلولی لنفوئیدی یا ماکروفاژهای موشی مورد مطالعه قرار می گیرد. هدف از این مطالعه ، ایجاد یک محیط کشت آکسنیک جدید جهت تکثیر تاکیزوئیت های توکسوپلاسما گوندی ای به منظور تهیه مقدار کافی از آنها بود. مواد و روش ها: لنفوبلاستوئیدهای گاوی آلوده به تیلریا آنولاتا، که با پاساژ های مکرر تا260 کشت برای تخفیف حدت دادن تیلریا آنولاتا حفظ شده بودند ، از نظر مناسب بودن آنها جهت تکثیر تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گوندی ای ارزیابی شدند. این فرآیند کشت به طور مداوم تا 10 پاساژ انجام شد و پس از هر 5 کشت ، 1/0 میلی لیتر از سوسپانسیون سلولی (حاوی یک میلیون تاکی زوئیت) به موش های بالب سی تلقیح شدند. نتایج: مشاهده شد که تاکی زوئیت ها به لنفوبلاستوئیدها حمله کرده و در داخل آنها تکثیر یافته و تعداد زیادی تاکی زوئیت های با شکل تیپیک و حرکت چرخشی خاص انگل در سوسپانسیون کشت حضور داشتند. در تمام مراحل کشت ، پاتوژنز انگل ها پایدار ماند و آنها توانستند در موش ها تکثیر یابند و در نهایت منجر به مرگ حیوانات شوند.نتیجه گیری: در این تحقیق یک روش جدید برای نگهداری طولانی مدت آزمایشگاهی تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گوندی ای ارایه گردید ، که هم از نظر نظر عملکرد و هم هزینه (چراکه به سرم جنین گوساله نیاز ندارد) بر سایر روش های سنتی حفظ انگل ارجحیت دارد.