بررسی فنوتیپی و مولکولی تولید بیوفیلم در استرپتوکوکوس موتانس های ایجاد کننده پلاک دندانی

مقدمه: پوسیدگی دندان یکی از مهم ترین معضلات جوامع می باشد. فعالیت باکتریهای تولید کننده ی اسید به ویژه بیوفیلم هایstreptococcus mutants اصلی‌ترین عامل ایجاد کننده‌ی این عارضه محسوب می‌شود. ایجاد بیوفیلم های باکتری مذکور منوط به حضور آنزیمی ویژه به نام گلوکان سوکراز یا گلوکوزیل ترانسفراز است که توسط ژن gtf کد می شود. هدف از این مطالعه بررسی ژن های موثر gtfb و gtfc باکتری streptococcus mutants در تشکیل بیوفیلم پلاک دندانی می باشد.مواد و روش ها: در بررسی بیوفیلم با استفاده از روش پلیت میکروتیتر بر روی سطوح پلی استیرنی تشکیل گردید استخراج dna با استفاده از کیت باکتریهای گرم مثبت سیناژن (cinna pure dna kitpr881614) صورت گرفت. جهت بررسی محصول pcr، نمونه ها بر روی ژل آگارز 1درصد منتقل شد .ph بهینه و تاثیر غلظت های مختلف ساکارز بر رشد باکتری به روش کدورت سنجی در طول موج 630 نانومتر با دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری شد.نتایج: یافته ها نشان داد از 46 نمونه مورد مطالعه 19 جدایه (41.30 درصد) واجد ژن gtfb و 8 مورد (17.4 درصد) واجد ژن gtfc بودند. میزان جذب نوری بیوفیلم تولیدی توسط نمونه ها با یکدیگر متفاوت بوده و بیشترین میزان جذب 1.43 میباشد. در این مطالعه بیشترین میزان رشد باکتری stereptococcus mutants جداشده از پلاک دندان در غلظت 0.5 گرم بر لیتر ساکارز و 4.5 =ph حاصل شد.بحث و نتیجه گیری: بنابراین قند ساکارز که قند معمول موجود در رژیم غذایی است سبب رشد باکتری stereptococcus mutants، که عامل اصلی پوسیدگی دندان است، می شود.

Evaluation of phenotypic and molecular analysis of biofilm production in stereptococcus mutants producing dental plaque

Tooth decay is one of the most important problems societie. the activity of acid producing bacteria, especially Streptococcus mutans, is the main cause of this complication. The creation of the biofilms of the bacterium is subject to the presence of a specific enzyme called glucan sucrase or glucosyltransferase, coded by gtf gene. The aim of this study was to evaluate the genes of GtfB and GtfC of Streptococcus mutans in the formation of dental plaque biofilm.Material Mthod: . In study, the biofilm was formed on a polystyrene surface using a microtiter plate and stained. In order to confirm Streptococcus mutans colonies, biochemical and fermentative tests were performed. DNA extraction from the kit of grampositive bacteria (Cinna Pure DNA KITPR881614) was used to extract DNA. To evaluate the PCR product, the samples were transferred to 1% agarose gel examined staining. optimum pH and the effect of different concentrations of sucrose on bacterial growth were measured at 630 nm using spectropHotometer.Results: The results showed that out of 46 samples, 19 isolates (41.30%) had gtfB gene and 8 (17.4%) had gtfC gene. The absorbance of the biofilm produced by the samples is different and the highest absorption is 1.43. In this study, the highest growth rate of Streptococcus mutans isolated from tooth plaque was obtained at a concentration of 0.5 g / L sucrose and pH = 4.5. Conclusion: Therefore, sucrose sugar, which is commonly found in the diet, causes the growth of Streptococcus mutans