تاثیر اسید سالیسیلیک جدا‌شده از سه گونه بید salix sp. در اختلاط با باکتری ‌bacillus thuringiensis b. روی لاروهای سن سوم و چهارم پروانه tortrix viridana l.

مقدمه و هدف: پروانه جوانه خوار بلوط یکی از مهم ترین آفات جنگلی قرنطینه داخلی است و لاروهای آن با تغذیه از جوانه های زایای درختان و با تغذیه از برگ خسارت سنگینی به درختان بلوط وارد می کنند. با توجه به اثرات تخریبی و زیان بار سموم شیمیایی، استفاده از روش های جایگزین به ویژه مهار زیستی با استفاده از دشمنان طبیعی و ترکیبات گیاهی به عنوان راهکار مدیریت تلفیقی آفات مورد استفاده قرار گرفته است. از میان عوامل زیستی بیمارگر حشرات باکتری bacillus thuringiensis b. برای داشتن مزیت های فراوان مانند اثر اختصاصی روی لارو بال پولکداران، تاثیر ناچیز روی محیط زیست و جانداران غیرهدف و همچنین سهولت تلفیق با سایر روش های کنترل، جایگاه ویژه ای در مدیریت کنترل آفات کشاورزی و جنگلی دارد. بررسی ها نشان داده که این باکتری در اختلاط با تانن های گیاهی خاصیت سینرژیستی نشان می دهد. اسیدهای عالی نظیر اسیدتانیک در اختلاط با باکتری b. thuringiensis می توانند به عنوان سینرژیست در کنترل لارو آفات مختلف مورد استفاده قرار گیرد. گونه های مختلف تیره بید salicaceae به واسطه داشتن سالیسین در پوست تنه، دارای خواص دارویی و صنعتی هستند. سالسین به عنوان یک تانن گیاهی می تواند در اختلاط با باکتری b. thuringiensis در کنترل جوانه خوار بلوط موثر باشد. از طرفی سالیسیلیک اسید به علت ترکیب فنولی، یکی از عوامل مهم رشد در گیاهان است. این ماده به عنوان یک متابولیت ثانویه در گیاهان تولید می شود. نقش اسید سالیسیلیک به عنوان یک ترکیب مهم در واکنش گیاه به تنش های غیرزیستی به اثبات رسیده است. سالیسیلیک اسید قابل حل در آب بوده و یک ترکیب آنتی اکسیدان است و نقش مهمی در پاسخ گیاه به تنش های غیر زنده مانند خشکی، سرما، فلزات سنگین ، گرما و تنش اسمزی دارد. به نظر می رسد پاسخ های متابولیکی را تقویت کرده، بر شاخص های فتوسنتزی و روابط آبی گیاه نیز اثر می گذارد .از این رو، این پژوهش برای استحصال و اندازه گیری ماده سالیسیلیک اسید در بید مجنون، بید سفید و بید بز و تاثیر آن به همراه باکتری b. thuringiensis روی آفت جوانه خوار بلوط انجام شد.مواد و روش: پوست بید مجنون، بید سفید و بید بز در فصل بهار و تابستان جمع آوری، خشک و پودر شد؛ عصاره گیری نمونه ها توسط دستگاه سوکسله و خالص سازی عصاره توسط دستگاه روتاری انجام شد. استخراج اسید سالیسیلیک طبق استاندارد tappi، با استفاده از حلال اتانول انجام شد. سپس مقادیر کشنده 50 درصد (lc50) باکتری b. thuringiensis که در آزمایشات زیست سنجی به دست آمده را با غلظت های یک، سه، پنج، هفت و نه درصد اسید سالیسیلیک گونه های بید ترکیب و روی لارو های سن سه و چهار t. viridana جمع آوری شده از جنگل های پردانان پیرانشهر کار رفت. در این آزمایش بعد از 48 ساعت حشرات تیمارشده با نزدیک کردن سوزن داغ به پاها و شاخک هایشان اگر حرکتی مشاهده نمی شد، مرده تلقی شدند. در این پژوهش برای هر تیمار سه تکرار درنظر گرفته شد. یافته ها: نتایج نشان داد که کل مواد استخراجی پوست درختان بید مجنون، بید سفید و بید بز به ترتیب 23.55، 36.25 و20.75 درصد وزن پوست آنها است. مقدار سالیسیلیک اسید در مواد استخراجی پوست بید مجنون، بید سفید و بید بز به ترتیب 15.20، 20.10 و 14.70 به دست آمد. مقدار کشندگی (lc50) باکتری b. thuringiensis روی لاروهای سن سوم و چهارم جوانه خوار بلوط 48 ساعت بعد از تیمار به ترتیب 659.77 و 742.45 ppm بود. درصد مرگ و میر لارو های سن سه و چهار جوانه خوار بلوط در اختلاط با یک، سه، پنج، هفت و نه درصد اسید سالسیلیک مستخرج از گونه بید مجنون، بید سفید و بید بز همراه با lc50 باکتری دارای اختلاف معنی داری بودند. درصد های بالای اسید سالیسیلیک سبب افزایش مرگ و میر لارو سن سوم جوانه خوار در هر سه گونه بید شد. نتایج اختلاط اسید سالیسیلیک استخراجی با غلظتlc50  باکتری b. thuringiensis در تمام غلظت ها روی لاروهای سن سوم نشان داد ترکیب اسید سالیسیلیک مستخرج از بید سفید با باکتری b. thuringiensis دارای بیشترین مقدار کشندگی نسبت به دو تیمار دیگر بود و در لاروهای سن چهارم اختلاط اسید سالیسیلیک مستخرج از بید سفید با غلظت lc50 باکتری در سه غلظت پنج، هفت و نه درصد از دو تیمار دیگر بیشتر بود.نتیجه گیری کلی: نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که باکتری b. thuringiensis اثر حشره کشی روی لاروهای پروانه t. viridana دارد و در اختلاط با اسید سالیسیلیک استخراج شده از سه گونه بید مجنون، بید سفید و بید بز اثرات کنترل کننده بهتری در مرگ و میر این آفت دارا است که بهترین اثر بخشی آن در اسید سالیسیلیک مستخرج از بید سفید مشاهده شد. با توجه به نتایج حاصل از این بررسی می توان از پوست گونه های مختلف بید به ویژه بید سفید در استخراج اسید سالیسیلیک استفاده و آن را در ترکیب با باکتری b. thuringiensis در مدیریت این آفت مهم جنگلی به کار برد.

effect of salicylic acid isolated from three native willow species in combination with bacillus thuringiensis b. on the oak leaf roller, tortrix viridana l.

introduction and objective: the oak leaf roller, tortrix viridana l., is one of the most important pests in oak forests in iran. this pest tops the list of domestic and quarantine forest pests and its larvae cause heavy damage to oak trees by feeding on the reproductive buds and leaves of trees. considering the destructive and harmful effects of chemical pesticides, especially biological control using natural enemies and plant compounds as alternative methods, have been used as integrated pest management solutions. among the biological factors, the insect pathogen, bacillus thuringiensis b. has a special place due to its many advantages such as specific effect on the larvae of lepidoptera order, insignificant effect on the environment and non-target organisms, as well as the ease of integrating with other control methods in the management of agricultural and forest pest control. studies have shown that this bacterium exhibits synergistic properties when combined with specific plant tannins. the organic acids like tannic acid, when mixed with b. thuringiensis, can serve as synergists in controlling various pest larvae. willow tree species, due to their salicin content in the bark, possess medicinal and industrial properties. salicin, as a plant tannin, can be effective when combined with b. thuringiensis in controlling oak leaf rollers. additionally, salicylic acid, due to its phenolic composition, is one of the essential growth factors in plants. this substance, as a secondary metabolite, is produced in plants. the role of salicylic acid as a critical compound in plant response to abiotic stresses has been well established. salicylic acid is water-soluble and acts as an antioxidant, playing a vital role in plant responses to non-living stresses such as drought, cold, heavy metals, heat, and osmotic stress. it seems to enhance metabolic responses, affecting plant photosynthetic parameters and water relations. therefore, this study was conducted to extract and measure salicylic acid in babylonian willow (salix babylonica), white willow (s. alba), and goat willow (s. caprea) and assess its impact in combination with b. thuringiensis on the oak leaf roller, t. viridana.materials and methods: the bark of babylonian willow, white willow, and goat willow was collected, dried, and powdered in spring and summer. sample extraction was carried out using a soxhlet apparatus, and the extract purification was done using a rotary device. salicylic acid extraction was performed according to the tappi standard using ethanol as a solvent. subsequently, the lethal concentrations (lc50) of b. thuringiensis obtained from bioassays were combined with salicylic acid concentrations of 1, 3, 5, 7, and 9% from the willow species and applied to third and fourth instar oak leaf roller larvae. in this experiment, insects treated were considered dead if no movement was observed upon close approach with a hot needle to their legs and thoracic appendages after 48 hours. each treatment in this research was replicated three times.findings: the results showed that the total extractable material percentages in the bark of babylonian, white and goat willow were 23.55, 36.25, and 20.75%, respectively. the salicylic acid content in the bark extract of babylonian, white, and goat willow was found to be 15.20, 20.10, and 14.70%, respectively. the mortality rate (lc50) of b. thuringiensis on third and fourth instar oak leaf roller larvae 48 hours after treatment was 659.77 and 742.45 ppm, respectively. the mortality rates of third and fourth instar oak leaf roller larvae in combination with 1, 3, 5, 7, and 9% salicylic acid extracted from babylonian, white and goat willow along with b. thuringiensis 's lc50 showed significant differences. higher percentages of salicylic acid led to an increase in mortality of third instar oak leaf roller larvae in all three willow species. the results of combining salicylic acid extract with b. thuringiensis at all concentrations showed that the combination of salicylic acid extracted from white willow with b. thuringiensis had the highest mortality rate compared to the other two treatments on third instar larvae. in fourth instar larvae, the combination of salicylic acid extracted from white willow with the lc50 concentration of bacteria was higher in three concentrations, 5, 7, and 9%, compared to the other two treatments.general conclusion: the results of this study demonstrated that b. thuringiensis have insecticidal effects on oak leaf roller larvae and when combined with salicylic acid extracted from three willow species (babylonian willow, white willow, and goat willow), they exhibit better control effects on the mortality of this pest, with the best effectiveness observed with salicylic acid extracted from white willow. based on the results of this research, it is possible to utilize the bark of various willow species, especially white willow, for extracting salicylic acid and employing it in combination with b. thuringiensis in managing this important forest pest.