|
|
|
|
ساخت ناقل‌های حاوی ترکیبات ژنی wri1 و lpaat و انتقال آن‌ها به گیاه توتون
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
داشچی سحر ,راهنما حسن ,چقامیرزا کیانوش ,زمانی کتایون
|
|
منبع
|
پژوهش هاي ژنتيك گياهي - 1399 - دوره : 7 - شماره : 2 - صفحه:41 -54
|
|
چکیده
|
در گیاهان دانه‌روغنی تعدادی از ژن‌های دخیل در مسیر ساخت تری‌آسیل‌گلیسرول شناسایی شده‌اند که تغییر در بیان این ژن‌ها سبب افزایش محتوای روغن دانه شده است. ژن‌های wri1 و lpaat از ژن‌های کلیدی در این مسیر سنتزی هستند که بیش‌بیان این ژن‌ها می‌تواند سبب افزایش محتوای روغن شود. در این تحقیق به‌منظور افزایش میزان روغن دانه، ناقل‌های بیانی حامل ژن‌های wri1 و lpaat طراحی و ساخته شدند. ژن‌های سنتزی wri1 و lpaat با استفاده از آنزیم‌های برشی اختصاصی از ناقل همسانه‌سازی pgh.wri1 و pgh.lpaat جدا و به‌صورت منفرد و جفتی در ناقل حد‌واسط pgh.o3.2.2 که حامل پیشبرهای اختصاصی sbp و napin و خاتمه‌گر e9 می‌باشد، همسانه‌سازی شدند. کاست‌های ژنی به ناقل بیانی دوگانه pbin19 وارد شدند. ناقل‌های نهایی بهagrobacterium tumefacience سویه eha105 منتقل و جهت بررسی صحت ساخت و بیان قطعه ژنی، در تراریختی گیاه مدل توتون به‌کار گرفته شدند. ارزیابی مولکولی گیاهان تراریخت، حضور و فعالیت ژن wri1 و lpaat را تایید کرد. بذور حاصل از گیاهان تراریخت در نسل بعد در محیط کشت حاوی کانامایسین، گیاهچه‌هایی سالم و قوی تولید کردند.
|
|
کلیدواژه
|
توتون، روغن دانه، wri1 ,lpaat ,agrobacterium tumefacience
|
|
آدرس
|
دانشگاه رازی, دانشکده علوم و مهندسی کشاورزی, گروه زراعت و اصلاح نباتات, ایران, سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی, پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران, ایران, دانشگاه رازی, دانشکده علوم و مهندسی کشاورزی, گروه زراعت و اصلاح نباتات, ایران, سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی, پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Construction of Plant Expression Vectors Harboring WRI1 and LPAAT Genes and Its Transformation in Tobacco Plants
|
|
|
|
|
Authors
|
Dashchi Sahar ,Rahnama Hassan ,Cheghamirza Kianoosh ,Zamani Katayun
|
|
Abstract
|
In oilseed crops, a number of genes involved in the production of triacylglycerol have been identified that changes in their expression have increase the seed oil content. WRI1 and LPAAT are key genes in this synthetic pathway that their overexpression can increase the oil content. In this study, the expression vectors carrying WRI1 and LPAAT genes were designed and constructed for genetic transformation of tobacco (Nicotiana tabaccum) plants. The synthetic WRI1 and LPAAT genes were isolated from the PGH.WRI1 and PGH.LPAAT cloning vector using specific restriction enzymes and then cloned in the PGH.O3.2.2 intermediate vector under the control of SBP and Napin promoters and E9 terminator. Finally, the genetic cassettes were transferred to the plant transformation pBin19 binary vector. The resulting constructs were transferred to Agrobacterium tumefacience strain EHA105 and were used for genetic transformation of tobacco plants. Molecular analysis of transgenic plants confirmed the presence and activity of WRI1 and LPAAT genes. Seeds from transgenic plants were selected on the medium containing kanamycin and developed strong and healthy seedlings.
|
|
Keywords
|
Agrobacterium tumefacience ,Oil seed ,Tobacco ,WRI1 ,LPAAT ,Agrobacterium tumefacience ,LPAAT ,WRI1
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|