مقایسه روش‌های متفاوت استخراج Dna و ایجاد روش Simplex Pcr به‌منظور شناسایی باقی‌مانده Dna ژنومی در فرآورده‌های رب گوجه‌فرنگی

امروزه با پیشرفت علم بیوتکنولوژی و روش‌های مولکولی به‌منظور بررسی ارگانیسم‌های موجود در فرآورده‌های غذایی از dna مارکرها و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (pcr) استفاده می‌شود. ازآنجایی‌که کیفیت dna برای تمامی آنالیزهای ژنتیکی که بر روی مارکرهای‌ مولکولی پایه‌ریزی شده باشد اهمیت زیادی دارد، روش استخراج dna ژنومی باکیفیت بالا حائز اهمیت است. در بیشتر روش‌های استخراجdna ژنومی سه نکته اساسی مدنظر است که شامل کیفیت dna استخراج‌شده، سرعت روش و میزان محصول آن می‌باشد. در این مطالعه 6 روش برای استخراج dna از فرآورده‌های گوجه‌فرنگی به‌منظور مطالعه تقلبات غذایی و بررسی حضور گوجه‌فرنگی دست ورزی ‌ژنتیکی ‌شده (gmo)، استفاده شد و درنهایت پس از انتخاب مناسب‌‌‌ترین روش، نمونه dna ژنومی جهت بررسی توسط پرایمرهای اختصاصی ناحیه d-loop میتوکندریایی مورد‌استفاده قرار گرفت. نتـایـج : در این مطالعه پس از بررسی‌های کمی و کیفی از طریق الکتروفورز و استفاده از دستگاه نانودراپ مشخص شد که از بین روش‌های استخراج dna ژنومی بررسی‌شده، روش wizard بر پایه اتصال اختصاصی dna به غشاهای‌ سیلیکایی (ستون) برای استخراج dna رب‌گوجه‌فرنگی مناسب‌ترین است. پس از استخراج dna از رب‌گوجه‌فرنگی، قطعه‌ مارکر 280 جفت ‌بازی از ناحیهd-loop میتوکندریایی‌گوجه‌فرنگی با استفاده از جفت آغازگرهای اختصاصی گوجه‌فرنگی طی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز به طور اختصاصی تکثیر شد و نتایج نشان داد کهdna رب‌گوجه‌فرنگی قابل تکثیر با آغازگرهای اختصاصی گوجه‌فرنگی می‌باشد. نتایج مطالعه انجام‌شده نشان داد می‌توان انواع نمونه‌های گوجه‌فرنگی را قبل و بعد از فرآوری از جهت بررسی تقلبات غذایی در رب‌گوجه‌فرنگی و حضور گوجه ترانس ژنتیک در مواد غذایی ترکیبی و فراوری‌شده موردبررسی قرارداد.