جداسازی و شناسایی یک سویه جدید مخمر pichia kudriavzevii مولد آنزیم زایلاناز مورد استفاده در صنایع غذایی

امروزه قریب به 400 نوع آنزیم شناسایی‌شده است که تقریبا 200 نوع از آنها در صنعت استفاده می‌شوند. جهت‌گیری بازار جهانی آنزیم‌ها نشان از سهم عمده‌ی زایلاناز، سلولاز و پکتیناز داردکه حدود 20% از این بازار را به خود اختصاص خواهند داد. آنزیم‌های زایلاناز در صنایع غذایی، خوراک دام و طیور، صنعت کاغذ، صنایع دارویی، صنعت نان، آبمیوه، تولید پروتئین تک یاخته، تبدیل سوخت جامد به مایع و تولید سوخت گاز مایع، شفافیت روغن خوراکی و تولید اتانل کاربرد دارند. هدف کلی از این پژوهش جداسازی و شناسایی مخمر مولد آنزیم زایلاناز مورد استفاده در صنایع غذایی است. نمونه‌گیری از پساب کارخانه‌های شهرک صنعتی و خاک مرغداری و گاوداری‌های سطح استان اصفهان انجام شد. برای غربال و سنجش کیفی نمونه مولد آنزیم زایلاناز، نمونه‌ها به‌صورت کشت خطی و دیسک‌گذاری بر روی محیط ypg حاوی چوب راش و سنجش کمی فعالیت آنزیم به روش dns و سنجش پروتئین به روش لوری انجام شد. سپس، برای شناسایی مولکولی جدایه برتر مولد زایلاناز، pcr و پس از آن توالی‌‌یابی و بلاست انجام شد و سویه جدید مولد آنزیم در بانک ژن جهانی ncbi ثبت شد. از میان مخمرهای جدا شده نمونه مخمر pichia kudriavzevii strain sbn-iauf-2 با حداکثر فعالیت آنزیم u/ml 1317/56 و حداکثر فعالیت ویژه‌ی آنزیمی u/mg 3271/652 پس از h 48 در دمای ºc 30 و سرعت هوادهی rpm 120 جداسازی و توالی 18srrna آن با شماره دسترسی mz816945 ثبت شد. این اولین گزارش از تولید زایلاناز توسط مخمر pichia kudriavzevii strain sbn-iauf-2 در جهان می‌باشد.

isolation and identification of xylanase-producing yeast, pichia kudriavzevii used in the food industry

today, among 400 types of identified enzymes, approximately 200 types are used in industry. theglobal enzyme market depict a major portion for xylanase, cellulase and pectinase at around 20%.xylanase enzyme is used in different industries such as food industry, animal and poultry feed, paperindustry and pharmaceutical industry. the aim of this study was to identify xylanase-producing yeast.effluents from factories and poultry farms in isfahan were sampled. in order to isolate the xylanaseproducing yeasts, the samples were cultured on ypg medium containing beech wood using streak plate method. the enzyme activity was measured by dns method and protein assay was done by lauriemethod. the molecular identification of the best xylanase-producing isolate was performed using pcrfollowed by sequencing and blasting procedures. the yeast pichia kudriavzevii strain sbn-iauf-2 wasisolated as the best xylanase producing yeast with the maximum enzyme activity of 1317.56 (u/ml) andmaximum specific enzyme activity of 3272/3271 (u/mg) after 48 hours at 30 degree celsius and aerationspeed of 120 rpm. the 18s-rdna partial sequence of the isolated yeast was deposited in genbank, ncbiunder the accession number of mz816945. this is the first report of isolation and identification of xylanase-producing yeast pichia kudriavzevii strain sbn-iauf-2 conducted in iran and it is recommended to be applied for optimal production of xylanase.